应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR技术
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
101/1返回列表
查看: 922  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

haifaaini

银虫 (初入文坛)

[求助] PCR技术

最近一直做pcr，一直没有结果，我该怎么设计实验，来判定是体系的问题，还是程序的问题呢？ 谢谢了
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-10 12:34:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
haifaaini(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-11 08:12:05
新虫小说两句，应该有阳性对照吧，要是阳性对照也不出，那应该就有问题了，可以优化一下pcr条件，做梯度pcr看改变温度了会不会出现结果吧，你做的是流调吧，也有可能本来就是样品的感染率低吧
赞一下 回复此楼
may
2楼2013-04-10 12:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shui_hanliu

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
haifaaini(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天 2013-04-11 08:12:23
增加一个阳性对照，可以是你们同学能够做得出结果的实验，按你的体系一一加入，用它的退火温度，如果能出来，说明体系没问题，你应该考虑模板是否正确，退货温度是否合适，还有引物没设计错吧
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haifaaini
3楼2013-04-10 13:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yujitianqing

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
haifaaini(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-11 08:12:34
一般是退火温度、引物或者是模板出问题。
退火温度出问题，可能使引物无法结合或错误结合；引物如果没设计好，可能出现二聚体；模板可能出现断裂……
你逐一检查下……
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haifaaini
4楼2013-04-10 13:26:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haifaaini

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 710002191 at 2013-04-10 12:51:11
新虫小说两句，应该有阳性对照吧，要是阳性对照也不出，那应该就有问题了，可以优化一下pcr条件，做梯度pcr看改变温度了会不会出现结果吧，你做的是流调吧，也有可能本来就是样品的感染率低吧

主要是没有现成的基因，没有办法做阳性对照，引物确实没有问题，有文献已经做出来的，我做的是同源克隆，退火温度用文献里的温度一直做不出来，不知道怎么回事？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-10 18:34:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haifaaini

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-04-10 13:26:39
一般是退火温度、引物或者是模板出问题。
退火温度出问题，可能使引物无法结合或错误结合；引物如果没设计好，可能出现二聚体；模板可能出现断裂……
你逐一检查下……

好的，我试一下，谢谢了。
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-10 18:35:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haifaaini

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by shui_hanliu at 2013-04-10 13:00:55
增加一个阳性对照，可以是你们同学能够做得出结果的实验，按你的体系一一加入，用它的退火温度，如果能出来，说明体系没问题，你应该考虑模板是否正确，退货温度是否合适，还有引物没设计错吧

我的基因没有现成的，没法做阳性对照，引物是别人设计好的，已经做出来的引物，应该不会错的，我就是觉得是不是退火温度的事？但是别人用那个引物和退火温度已经做出来了，我怕是体系的问题，不知道该怎么办？
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-10 18:37:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

710002191

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
haifaaini: 金币+15, ★★★很有帮助 2013-04-11 18:07:24
引用回帖:
5楼: Originally posted by haifaaini at 2013-04-10 18:34:52
主要是没有现成的基因，没有办法做阳性对照，引物确实没有问题，有文献已经做出来的，我做的是同源克隆，退火温度用文献里的温度一直做不出来，不知道怎么回事？...

要是中文文献的话，我只想说文献里都是骗人的，你不可能做出那样的结果，要是英文文献的话应该在看看吧，也是有可能的
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haifaaini
may
8楼2013-04-11 08:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haifaaini

银虫 (初入文坛)
送红花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 710002191 at 2013-04-11 08:09:18
要是中文文献的话，我只想说文献里都是骗人的，你不可能做出那样的结果，要是英文文献的话应该在看看吧，也是有可能的...

谢谢你，那我再看看。
赞一下 回复此楼
9楼2013-04-11 18:07:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

情毒之殇

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
会不会是酶的问题？我现在大三，但是跟老师一起做PCR一年了，通常实验一直没结果，老师会让换一支酶尝试一下
赞一下 回复此楼
我们的心是荒野还是沃土？！
10楼2013-04-12 15:27:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 haifaaini 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学 +20 妮妮ninicgb 2026-04-04 23/1150 2026-04-06 23:06 by chenzhimin
[考研] 华南理工0703化学，总分336求调剂 +10 手机用户 2026-04-03 11/550 2026-04-06 22:20 by michael2011
[考研] 266求调剂 +19 阳阳哇塞 2026-04-01 19/950 2026-04-06 15:47 by lin-da
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 本科211，293分请求调剂 +8 莲菜就是藕吧 2026-04-03 9/450 2026-04-05 19:12 by 蓝云思雨
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 323求调剂（计算机视觉和大模型项目经历） +3 chaoxiicy 2026-03-31 3/150 2026-04-05 10:33 by zhq0425
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-04 20:37 by 蓝云思雨
[考研] 321求调剂 +6 认真求上学 2026-04-03 6/300 2026-04-04 19:51 by dongzh2009
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
[考研] 一志愿0817化学工程与技术，求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +3 农业工程与信息� 2026-04-04 3/150 2026-04-04 12:19 by 舍而后得
[考研] 一志愿北京科技大学材料工程085601，求调剂 +17 cdyw 2026-04-02 18/900 2026-04-04 11:14 by w_xuqing
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 求材料调剂 一志愿南昌大学 328分 +5 yyy..... 2026-04-03 5/250 2026-04-03 13:46 by 百灵童888
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术，求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +3 李木子0120 2026-04-02 5/250 2026-04-02 21:45 by dongzh2009
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿 南京航空航天大学 ，080500材料科学与工程学硕 +10 @taotao 2026-03-31 11/550 2026-04-01 09:43 by xiayizhi
[考研] 考研材料工程351分调剂 +5 整个好的 2026-03-31 5/250 2026-04-01 09:36 by topgun2009
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭