应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » MTT求助
51/1返回列表
查看: 1162  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

若乔西木

银虫 (初入文坛)

[求助] MTT求助

我刚上手做MTT试验，养的细胞是HepG2.有几个问题，希望各位高手能帮我解答。
1.  细胞计数  用计数板计数的时候，是先计数，然后稀释到想要的浓度，还是先稀释到差不多的样子再去计数啊？
2. 96孔板接种的密度   一般大家都说5000/孔，我按这个浓度种板后24小时仍发现96孔板里每个孔里的细胞长的并不是很多（20%），是不是这个密度还是太低了。
3.  我种板后发现我的细胞长的并不均匀，集中在每个孔的中间，外周几乎没有。这是细胞的生长习性还是我种板时没有种好啊?我种板后会学着别人把板左右上下往返移动3下，这样到底好不好啊？怎样才能使细胞均匀分散在孔里面呢？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-10 08:47:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

若乔西木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by gyesang at 2013-04-10 15:37:13
1.如果细胞密度过大，可以稀释10倍计数，如果不大的话，就直接计数吧

2. 至于接种密度，要看你做什么用途，细胞的继续培养时间，选择合适的细胞种板个数

3. 细胞种的均匀，看2楼分析

谢谢这位好心的朋友。我打算种板后总共培养3天，那就是说估计一个种板密度，使其3天后会长满到90%左右是吗？
赞一下 回复此楼
6楼2013-04-10 16:14:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-04-10 15:34:34
若乔西木: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-04-10 16:03:46
1、首先肯定得先计数在稀释到相应的浓度。
2、对于接种密度这个问题，我觉得可以根据自己所需来灵活接种，这个没有绝对的定量。
3、对于细胞全部跑到中间去了这个问题。我觉得这是个技术活，楼主种好后一定要轻拿轻放；或者种好后放在超净台静置10分钟左右再拿出来放在培养箱里面；或者左敲敲右敲敲上敲敲下敲敲再放进培养箱里面。
赞一下 回复此楼
keepon
2楼2013-04-10 14:19:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
若乔西木: 金币+1, ★有帮助, 多谢 2013-04-10 16:04:06
小丹木木: 金币+2, 斑斑辛苦 2013-04-10 16:42:25
1.如果细胞密度过大，可以稀释10倍计数，如果不大的话，就直接计数吧

2. 至于接种密度，要看你做什么用途，细胞的继续培养时间，选择合适的细胞种板个数

3. 细胞种的均匀，看2楼分析
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2013-04-10 15:37:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

若乔西木

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2013-04-10 14:19:53
1、首先肯定得先计数在稀释到相应的浓度。
2、对于接种密度这个问题，我觉得可以根据自己所需来灵活接种，这个没有绝对的定量。
3、对于细胞全部跑到中间去了这个问题。我觉得这是个技术活，楼主种好后一定要轻拿 ...

谢谢楼上朋友。对于第2个问题，我有问过我同学，他说他做MTT实验接种后细胞贴壁即给药，那时他的细胞已经长到70-80%，然后我想想我的细胞密度和生长速度，无论怎么样也达不到那个密度。是种板的时候就把细胞密度种大一点吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-10 16:03:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料学硕318求调剂 +14 February_Feb 2026-03-01 16/800 2026-03-02 11:17 by yuchj
[考研] 281求调剂 +5 2026计算机_诚心 2026-03-01 8/400 2026-03-02 11:05 by 汪！？！
[考研] 264求调剂 +4 巴拉巴拉根556 2026-02-28 4/200 2026-03-02 10:48 by yuchj
[基金申请] 成果系统访问量大，请15分钟后再尝试。由此给您造成的不便，敬请谅解。 +4 xhuama 2026-03-02 4/200 2026-03-02 10:28 by 19850826zhao
[考研] 化工270求调剂 +6 什么名字qwq 2026-03-02 6/300 2026-03-02 10:21 by 黑！在干嘛
[考研] 高分子化学与物理调剂 +6 好好好1233 2026-02-28 13/650 2026-03-02 07:27 by 好好好1233
[考研] 材料化工调剂 +12 今夏不夏 2026-03-01 13/650 2026-03-01 23:32 by L135790
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +6 礼堂丁真258 2026-02-28 8/400 2026-03-01 22:50 by jian_
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +3 weizhong123 2026-03-01 3/150 2026-03-01 21:42 by 公瑾逍遥
[考研] 0856求调剂285 +10 吕仔龙 2026-02-28 10/500 2026-03-01 21:37 by 公瑾逍遥
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[基金申请] 刚录用，没有期刊号，但是在线可看的论文可以放为代表作吗 10+3 arang1 2026-03-01 3/150 2026-03-01 16:43 by babero
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[论文投稿] 求助coordination chemistry reviews 的写作模板 10+3 ljplijiapeng 2026-02-27 4/200 2026-03-01 09:07 by babero
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭