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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min，但系统没有泄漏，柱压也稳定，是什么问题导致？
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qiuling

金虫 (小有名气)

[求助] HPLC柱压突然降低20bar,保留减弱7min，但系统没有泄漏，柱压也稳定，是什么问题导致？

色谱柱：Waters XBridge C18；流动相：磷酸盐和乙腈，梯度变化，乙腈比例从25%到40%，柱温25度。前一天压力为170bar，测定样品正常；第二天柱压就突然降低20bar至150bar，保留从23min减至16min，峰形柱效却无明显变化。经排查，系统没有泄漏，柱压150bar也稳定，没有气泡，样品和流动相等都没有什么问题。是什么原因导致柱压突然降低而保留减弱？如果是柱子坍塌，峰形柱效为何无明显变化？希望高手答疑！非常感谢！
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1楼 2013-04-09 14:43:43
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qiuling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 哎呀呀小丫丫 at 2013-04-10 11:37:48
使用磷酸盐缓冲液前，应当先用水/乙腈将系统平衡，之后再换上磷酸盐，否则盐析出，阻塞单向阀，导致压力偏低。将柱子取下，磷酸盐溶液换成水冲洗一下管路。

色谱柱使用流动相前都是用水/甲醇平衡系统和柱子的。
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9楼2013-04-10 12:51:42
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djjreal

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiuling: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 10:49:05
不知道你的液相具体发生了什么，如果只是两天比较的话，你看看在你做之前是不是做过什么，系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化，保留时间改变那么多？两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题，梯度的柱压在25%到40%的过程中保持不变的吗？
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2楼2013-04-10 09:56:08
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cpuliuwei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qiuling: 金币+2, ★有帮助 2013-04-10 10:49:42
泵流量不准或有机相的那个泵流量不准，一般是轻微污染了。
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3楼2013-04-10 10:15:44
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qiuling

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by djjreal at 2013-04-10 09:56:08
不知道你的液相具体发生了什么，如果只是两天比较的话，你看看在你做之前是不是做过什么，系统没有充分平衡也有可能造成柱压跟保留时间变化，保留时间改变那么多？两天的流动相是不是同一瓶的
我倒是有个问题，梯度 ...

流动相是同一瓶，系统充分平衡。两天之间这根柱子没有做过其他的试验。我提到的柱压变化指的是25%时的压力变化（两天之间），40%是随着梯度变化的，在这我就没提了。谢谢您！
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4楼2013-04-10 10:48:55
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