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echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 守好我的道 at 2013-04-10 02:03:11
做个实验对照。个人认为可以这样设计:首先用你所用的pET28B,直接转化,涂板。长斑正常,说明你用的平板,感受态细胞和转化的操作没有问题。其次再验证你的酶切和连接有没有问题。一个一个的验证,实验做不出来,总 ...

在做转化的时候,平板如果放的时间比较长(2周内),菌液涂上去快速就干掉, 这样是不是就不会长菌了?
11楼2013-04-27 21:28:01
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守好我的道

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
silicare: 金币+5, 应助指数+1, 鼓励新虫发帖交流 2013-04-28 09:58:21
平板是容易染菌的,建议保存时间不要过十天。但是,我们也有用过保存一个月的平板(用保鲜膜包好,4度保存),取决于你倒置平板时的无菌操作。
菌液涂上去,干的速度是比较的快,100ul的菌液,三十分钟应该就会干了。至于会不会长菌?很大的程度取决于你连接的好坏。祝顺利。
12楼2013-04-27 21:39:57
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xutao

金虫 (著名写手)

第三军团总参谋

涂个空白版试试,如果不行说明感受态有问题;
降低平板中抗生素浓度
第三军团
13楼2013-05-05 16:02:27
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
13楼: Originally posted by xutao at 2013-05-05 16:02:27
涂个空白版试试,如果不行说明感受态有问题;
降低平板中抗生素浓度

现在空白对照验明是感受态问题,我们没有4度离心机,想求问怎么做感受态呢?注意事项有什么呢?
14楼2013-05-08 08:28:14
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echochen1017

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
12楼: Originally posted by 守好我的道 at 2013-04-27 21:39:57
平板是容易染菌的,建议保存时间不要过十天。但是,我们也有用过保存一个月的平板(用保鲜膜包好,4度保存),取决于你倒置平板时的无菌操作。
菌液涂上去,干的速度是比较的快,100ul的菌液,三十分钟应该就会干了 ...

放的太久的话,涂上去立马就干。。。。现在发现应该是感受态的问题。。。但是同批做的DH5α的感受态就没问题,因为同期构建了另外一个质粒,成功了
15楼2013-05-08 08:29:37
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