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qinhuan0425新虫 (初入文坛)
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包涵体复性
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| 我要需要将包涵体变性，复性后挂镍柱纯化！我的蛋白大小是19KD左右，100ml菌液诱导表达后将沉淀溶于1ml缓冲液中，8M尿素变性，4度过夜，过夜后开始透析复性，问题一.1ml蛋白液加到透析袋中体积少吗？透析袋外体积用多少的呢？透析袋用7KD的还是3KD的呢？二：透析复性的尿素浓度8M-6M-4M-2M-0这样吗？三：复性完后透析袋内蛋白液体积会增加吗？ |
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zc10052157
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qinhuan0425
6楼2013-04-09 16:20:21
sunjiutong
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amisking: 回帖置顶 2013-04-09 19:58:30
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amisking: 回帖置顶 2013-04-09 19:58:30
| 第一个问题，1ml蛋白液可以透析，放在烧杯里透析即可，最好借助磁力搅拌4摄氏度条件下进行。至于透析袋的大小，根据目的蛋白的大小而定，理论上7kd的袋子可以用。第二个问题，没做过。不敢多说，理论上你的方案可行。第三个问题，透析袋是选择性半透膜，小分子可自由出入。体积会否增加要看你的透析袋内外的水势。仅供参考 |
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2楼2013-04-09 10:33:26
qinhuan0425
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3楼2013-04-09 10:43:04
zc10052157
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4楼2013-04-09 11:27:57
