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nfuyuer

木虫 (正式写手)

[求助] 原位杂交 与 gus 染色 需不需要都做

我的 实验材料是南瓜,想看一个位于根韧皮薄壁组织细胞膜上一个转运蛋白基因的表达情况。
    目前该基因的全长及启动子什么的在南瓜中没有报道,但该基因在拟南芥、水稻、大麦等模式植物中已经研究充分。现在的想法是希望明确该编码转运蛋白基因在组织水平(根的不同部位——皮层,内皮层等)及亚细胞水平(细胞膜、液泡膜)上的表达情况。看了一些别人的文献,好像gus和原位杂交都能对基因表达进行定位,那么请问针对我的实验目的,如何选择合适的方法?是否gus在这种条件下无法使用?希望实验最终能获得比较漂亮的照片,我看gus的图片都很好,荧光原位杂交是不是出的图像要差一点呢?
   刚开始涉及分子实验,希望大家不吝赐教。
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make·believe
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niushuaiji

金虫 (正式写手)

不放弃的小鸟

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2013-04-09 07:41:52
如果要进行亚细胞定位的话,一般都是用GFP,而组织定位个人感觉GUS比较方便,染色之后普通显微镜下都可看不需要使用共聚焦!
Tobeornottobe,that'saproblem
7楼2013-04-08 09:16:09
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wxf8470

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-07 08:57:22
包埋后切片,如果能做的话GUS就能解决问题。
2楼2013-04-06 20:41:55
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running113

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-07 08:56:57
看你的意思应该对已知基因的研究。
个人感觉原位杂交比较适合于已知基因。
gus定位没有使用过,感觉比较适合于做外源基因导入的报告实验。
呵呵!
有没有其他高手也来给解答一下。
SCI我来了!!!
3楼2013-04-06 20:57:25
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夏尔list

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-04-07 08:57:09
都能说明问题吧,gus容易一点吧
4楼2013-04-07 00:47:35
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