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jinqimaggie铁虫 (小有名气)
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[求助]
PCR miRNA的模板 纯化后浓度过低怎么办 谢谢!!
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我用的 phusion DNA polymerase, dNTPs DMSO 和引物(有重叠区域)来做miRNA的模板, 做了十管50微升的反应,30个cycle,温度分别是98,98,58,72,4 摄氏度。 然后我把十管收集起来一起纯化,(cycle pure kit),纯化后浓度只有23ng/微升。 但是听老师说要想做后面的转录,模板浓度要至少在微克数量级, 我该怎么提高模板浓度, miRNA的分子量在72bp,它的模板应该也不大, 请各位大神帮助,谢谢!! |
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