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yuanalice

银虫 (小有名气)

[求助] 急求助有经验的转染高手,瞬转放大后转染效率变低

瞬时转染COS-7细胞效率可以达到70%左右,可是由24孔板放大到10mm的平皿时,转染效率却有明显的下降,质粒量和转染试剂的数量都是按照说明书添加的呀,这是为什么呢,希望有经验的转染高手帮忙解答呀!
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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yuanalice: 金币+2, 有帮助 2013-04-03 12:08:36
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-05 13:48:56
转染效率本身就不稳定,每次实验都有差别,然后你扩大到10mm培养皿中,细胞数质粒数等有按照相应的倍数变换吗
生物化学与分子生物学
2楼2013-04-03 10:49:30
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ytxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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yuanalice: 金币+2, 有帮助 2013-04-07 09:50:04
瞬时转染会由于细胞增殖而稀释,另外由于导入的是外源质粒,也很快会被降解掉。
3楼2013-04-03 10:59:28
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yuanalice

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lidonghong at 2013-04-03 10:49:30
转染效率本身就不稳定,每次实验都有差别,然后你扩大到10mm培养皿中,细胞数质粒数等有按照相应的倍数变换吗

是的,质粒的量和转染试剂的量都有增加呀!
4楼2013-04-03 12:09:21
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lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
yuanalice: 金币+2, 有帮助 2013-04-07 09:50:19
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuanalice at 2013-04-03 12:09:21
是的,质粒的量和转染试剂的量都有增加呀!...

那就与每次的转染效率有关了。
生物化学与分子生物学
5楼2013-04-03 14:41:43
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