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z1358382木虫 (正式写手)
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分离纯化大米培养基中化合物
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| 用大米培养基培养真菌，产生毒素后，进行提取分离纯化。提取溶液使用84%乙腈水，旋转蒸发后基本上都是水溶液，然后过滤后直接进制备液相纯化分离收集目标峰，但是收集的馏分还呈现淡黄色，也不知道里面还含有什么东西？？请教各位大侠我应给怎么样进行工艺上改进，不胜感激。附上：此化合物溶于乙腈、甲醇及水溶液，热稳定。。 |
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6楼2013-04-05 23:29:00
huaqiangliu
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
z1358382: 金币+10, ★★★很有帮助, 十分感谢您的帮助，东西我直接进制备液相可以分离的很好。但是制备液相出来的东西有颜色，是不是前处理好好弄一下，颜色问题也可以解决。另外我的东西吹干以后也有看不到固体粉末 状的东西，还请帮忙指点一下这个怎么回事 2013-04-03 11:09:15
PSA: 金币+5, 鼓励新虫，欢迎常来药学版交流 2013-04-03 11:28:44
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一看，老师您就是有钱人。发酵提出来的东西，悬蒸后直接上制备液相，这样一般是不行的。因为发酵液里的物质相当复杂，你用乙腈水提取，能够提取大量的油脂和色素到你的提取液中，直接上液相是分不到纯度很高的产品的，因为杂质之间互相影响，再就是你的制备柱也不便宜吧，用几次基本就玩完了，有可能你的试验还没做完，柱子先完了。一般我们分东西至少纯度到80以上才用制备，东西也好分。我给你提供各思路，乙腈水提取液-20度冰柜放置24小时，乙腈水分层，取两项分别分析，看你要的物质在那一层，在水相的话（不在水相调下PH看看再冷冻试试）你用SKP-10-4300层析树脂上柱，乙腈水洗脱把你的东西分到80%以上，如果直接分到95%以上你就不用制备了。不到95%你拿你的制备搞以下基本解决了。如果你的东西在乙腈相或者两相都有，就悬蒸掉乙腈，用正己烷萃取下，取水向上树脂，在上制备。 祝你好运 |
2楼2013-04-03 10:39:49
huaqiangliu
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【答案】应助回帖
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一看，老师您就是有钱人。发酵提出来的东西，悬蒸后直接上制备液相，这样一般是不行的。因为发酵液里的物质相当复杂，你用乙腈水提取，能够提取大量的油脂和色素到你的提取液中，直接上液相是分不到纯度很高的产品的，因为杂质之间互相影响，再就是你的制备柱也不便宜吧，用几次基本就玩完了，有可能你的试验还没做完，柱子先完了。一般我们分东西至少纯度到80以上才用制备，东西也好分。我给你提供各思路，乙腈水提取液-20度冰柜放置24小时，乙腈水分层，取两项分别分析，看你要的物质在那一层，在水相的话（不在水相调下PH看看再冷冻试试）你用SKP-10-4300层析树脂上柱，乙腈水洗脱把你的东西分到80%以上，如果直接分到95%以上你就不用制备了。不到95%你拿你的制备搞以下基本解决了。如果你的东西在乙腈相或者两相都有，就悬蒸掉乙腈，用正己烷萃取下，取水向上树脂，在上制备。 祝你好运 |
3楼2013-04-03 10:42:23
z1358382
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4楼2013-04-03 11:10:27
40