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z1358382

木虫 (正式写手)

[求助] 分离纯化大米培养基中化合物

用大米培养基培养真菌,产生毒素后,进行提取分离纯化。提取溶液使用84%乙腈水,旋转蒸发后基本上都是水溶液,然后过滤后直接进制备液相纯化分离收集目标峰,但是收集的馏分还呈现淡黄色,也不知道里面还含有什么东西??请教各位大侠我应给怎么样进行工艺上改进,不胜感激。附上:此化合物溶于乙腈、甲醇及水溶液,热稳定。。
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一心向佛
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huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
z1358382: 金币+10, ★★★很有帮助, 十分感谢您的帮助,东西我直接进制备液相可以分离的很好。但是制备液相出来的东西有颜色,是不是前处理好好弄一下,颜色问题也可以解决。另外我的东西吹干以后也有看不到固体粉末 状的东西,还请帮忙指点一下这个怎么回事 2013-04-03 11:09:15
PSA: 金币+5, 鼓励新虫,欢迎常来药学版交流 2013-04-03 11:28:44
一看,老师您就是有钱人。发酵提出来的东西,悬蒸后直接上制备液相,这样一般是不行的。因为发酵液里的物质相当复杂,你用乙腈水提取,能够提取大量的油脂和色素到你的提取液中,直接上液相是分不到纯度很高的产品的,因为杂质之间互相影响,再就是你的制备柱也不便宜吧,用几次基本就玩完了,有可能你的试验还没做完,柱子先完了。一般我们分东西至少纯度到80以上才用制备,东西也好分。我给你提供各思路,乙腈水提取液-20度冰柜放置24小时,乙腈水分层,取两项分别分析,看你要的物质在那一层,在水相的话(不在水相调下PH看看再冷冻试试)你用SKP-10-4300层析树脂上柱,乙腈水洗脱把你的东西分到80%以上,如果直接分到95%以上你就不用制备了。不到95%你拿你的制备搞以下基本解决了。如果你的东西在乙腈相或者两相都有,就悬蒸掉乙腈,用正己烷萃取下,取水向上树脂,在上制备。

祝你好运
2楼2013-04-03 10:39:49
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huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一看,老师您就是有钱人。发酵提出来的东西,悬蒸后直接上制备液相,这样一般是不行的。因为发酵液里的物质相当复杂,你用乙腈水提取,能够提取大量的油脂和色素到你的提取液中,直接上液相是分不到纯度很高的产品的,因为杂质之间互相影响,再就是你的制备柱也不便宜吧,用几次基本就玩完了,有可能你的试验还没做完,柱子先完了。一般我们分东西至少纯度到80以上才用制备,东西也好分。我给你提供各思路,乙腈水提取液-20度冰柜放置24小时,乙腈水分层,取两项分别分析,看你要的物质在那一层,在水相的话(不在水相调下PH看看再冷冻试试)你用SKP-10-4300层析树脂上柱,乙腈水洗脱把你的东西分到80%以上,如果直接分到95%以上你就不用制备了。不到95%你拿你的制备搞以下基本解决了。如果你的东西在乙腈相或者两相都有,就悬蒸掉乙腈,用正己烷萃取下,取水向上树脂,在上制备。

祝你好运
3楼2013-04-03 10:42:23
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z1358382

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by huaqiangliu at 2013-04-03 10:42:23
一看,老师您就是有钱人。发酵提出来的东西,悬蒸后直接上制备液相,这样一般是不行的。因为发酵液里的物质相当复杂,你用乙腈水提取,能够提取大量的油脂和色素到你的提取液中,直接上液相是分不到纯度很高的产品的 ...

很有帮助, 十分感谢您的帮助,东西我直接进制备液相可以分离的很好。但是制备液相出来的东西有颜色,是不是前处理好好弄一下,颜色问题也可以解决。另外我的东西吹干以后也有看不到固体粉末 状的东西,还请帮忙指点一下这个怎么回事
一心向佛
4楼2013-04-03 11:10:27
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huaqiangliu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

最好前处理以下,我做过好多发酵项目,也有用制备的,但是没有这么干的。还是前处理一下吧。有些东西在你检测波长下是没有吸收的。你色谱检测纯度可能99%,你的含量可能只有50%,这是经常碰到的事情。一你的物质熔点较低,二是你分得东西确实不纯赵成吹干不是固体。
5楼2013-04-03 11:37:27
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dengyry

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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karl2100: 金币+1, 3Q 2013-04-06 02:56:21
z1358382: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-06 10:54:45
馏分黄色并不能说明东西不纯,需要薄层和核磁看一下,做天然产物的经常拿到颜色很深的东西核磁纯度超好。
6楼2013-04-05 23:29:00
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z1358382

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dengyry at 2013-04-05 23:29:00
馏分黄色并不能说明东西不纯,需要薄层和核磁看一下,做天然产物的经常拿到颜色很深的东西核磁纯度超好。

我现在纯化液吹干后不能产生粉末状东西,这是怎么回事呢???
一心向佛
7楼2013-04-06 20:04:14
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dengyry

金虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by z1358382 at 2013-04-06 20:04:14
我现在纯化液吹干后不能产生粉末状东西,这是怎么回事呢???...

有些化合物就是油状物,
8楼2013-04-07 11:36:43
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yingfangb

新虫 (初入文坛)

老师您好,我现在也在检测真菌产毒素的情况,所以想向您请教一个问题,大米培养基的配制过程是怎么做的?谢谢您
9楼2015-12-21 10:07:48
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