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yhdchina

新虫 (初入文坛)

[交流] 请圆二色谱仪高手指点 已有2人参与

我要做一个多肽药物的结构,39个氨基酸。先用圆二色谱做二级结构,再用核磁共振做三级结构。请问用圆二色谱,对样品有什么要求,比如:浓度、纯度、一次要多大量等等。谢谢!
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by yhdchina at 2013-04-02 09:11:43
你好!液体CD,在EK酶缓冲液中的。...

那浓度要保证CD的紫外的吸收在0-3之间即可!纯度那肯定越纯越好!
4楼2013-04-03 08:37:40
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zjlqingdao

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
您是做固体CD还是液体CD?
2楼2013-04-02 08:48:44
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yhdchina

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zjlqingdao at 2013-04-02 08:48:44
您是做固体CD还是液体CD?

你好!液体CD,在EK酶缓冲液中的。
3楼2013-04-02 09:11:43
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e2zhanbo

铜虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
测二级结构,通常波长范围在180-260nm,建议先用1mm光程的干净的比色皿;
纯度建议在95%以上;

浓度要通过紫外吸收调整,在波长范围内峰值处的吸收最好在0.5-2.0之间;
同时要尽量降低EK酶的吸收,越小越好;

如果是1mm比色皿,其容积是300ul,加样200ul 就足够,加上操作中损耗,可以预估
5楼2013-04-03 12:00:16
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