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YHWS-441

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR和电泳

我想请教下各位前辈,我最近在做PCR,反应完成后,进行琼脂糖凝胶电泳,但是跑出来目的条带比预计的目的条带要长,这是怎么回事呢?应该如何避免?
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在水1方

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你提取出的质粒浓度怎么样,你的上样量是多少?可能使你上样量多的缘故吧。
2楼2013-03-31 21:07:08
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xy656691

金虫 (正式写手)

把电泳图发上来看看才好说明具体是哪的问题
3楼2013-03-31 22:05:24
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YHWS-441

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 在水1方 at 2013-03-31 21:07:08
你提取出的质粒浓度怎么样,你的上样量是多少?可能使你上样量多的缘故吧。

我才刚刚跑电泳,没有到提取质粒这一步,
4楼2013-04-02 08:17:57
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YHWS-441

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 在水1方 at 2013-03-31 21:07:08
你提取出的质粒浓度怎么样,你的上样量是多少?可能使你上样量多的缘故吧。

图片如下

13.3.28.jpg

5楼2013-04-02 08:20:50
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好好后生

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by YHWS-441 at 2013-04-02 08:20:50
图片如下

13.3.28.jpg
...

最左边是marker的话。。。这明明是最短,是没P出来啊
6楼2013-04-02 15:14:43
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牧歌ping

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
YHWS-441(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-26 21:19:48
gyesang: 回帖置顶 2013-04-26 21:19:54
泳道最前面的亮团小于200bp,应该是引物二聚体,你没P出来,先检查下你设计的引物吧,然后调整下退火温度,再重新扩增试试
7楼2013-04-02 15:40:47
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84146922

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-05-31 16:48:20
引用回帖:
5楼: Originally posted by YHWS-441 at 2013-04-02 08:20:50
图片如下

13.3.28.jpg
...

最低的带是引物二聚体,不是你所需要的目的带,建议检查体系,进行温度梯度PCR
8楼2013-04-02 18:51:12
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YHWS-441

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 84146922 at 2013-04-02 18:51:12
最低的带是引物二聚体,不是你所需要的目的带,建议检查体系,进行温度梯度PCR...

谢谢,我想请问一下,怎样来分辨自己跑出来的条带是目的基因还是引物二聚体呢?
9楼2013-04-03 07:57:56
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84146922

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by YHWS-441 at 2013-04-03 07:57:56
谢谢,我想请问一下,怎样来分辨自己跑出来的条带是目的基因还是引物二聚体呢?...

二聚体一般在泳道最下面,而且比较弥散~
10楼2013-05-31 21:04:29
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