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RT-PCR问题
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寄生虫的某目的基因的表达量较低，在28左右，为验证其在组织中不同时期的表达量差异，设计RT-PCR实验。共提了6管RNA，1、2两管是直接从寄生虫中提取，3、4、5、6是从感染了此种寄生虫的动物组织中提取；SYBR荧光定量PCR两步法时，1、2样品的扩增曲线和溶解曲线良好，可是3、4、5、6却不行；怀疑是样品有问题，以cDNA为模板，用RT-PCR引物做普通PCR，能扩增出特异性条带，无引物二聚体。请问我这实验可能是哪里出问题了呢？谢谢各位了！ PS：附上图片，请大家帮忙分析分析。 说明一下：扩增曲线，前面四条是1、2两样品的目的基因；后面四条是1、2两样品的内参基因的。（每个样品做了两个重复） 电泳图：1-6泳道是目的基因，7为水对照，8-13为内参基因。  扩增曲线.jpg  溶解曲线.jpg  电泳图.jpg |
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