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感受态转化后,没有出现单菌落但菌长了一大片
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| 感受态转化后,没有出现单菌落但菌长了一大片,验证了一下是不是抗生素Kana(与培养基1:1000的比例)失效了,用100 微升的BL21原菌株涂平板,长了20多个单菌落。後来用新买的Kana试了,还是长了单菌落,求高人指点一样,这是什么原因? |
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5楼2013-03-28 19:45:55
lcat
木虫 (小有名气)
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- 性别: GG
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2楼2013-03-28 14:05:02
3楼2013-03-28 14:39:14
bingdong05
银虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-26 21:57:04
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-26 21:57:04
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1)怀疑BL21原菌株被污染:可取bl21菌株接至含有抗生素的液体lb中,过夜,看是否生长 2)若菌株未被污染,向培养基中添加抗生素时等培养基温度降至40度左右再添加;转化子在sos培养基中培养一小时后,不要离心,先取100ul徒步平板,剩下的离心,去上清至100ul,徒步平板,另外:未转化的感受态,培养1h后,涂布含有抗生素的平板;第二天观察几个平板菌落的生长情况,看感受态是否被污染还是转化率过高所致。 |
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4楼2013-03-28 16:44:54













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wmhye