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axian1

新虫 (著名写手)

[求助] 【求助】10×Hanks溶液配方

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bingge880306

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
axian1: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-04 11:28:03
Hanks 液的配制
Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS ),简称H。主要用于配制配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。
原液A   
NaCl 160g
MgSO4·7H2O 2g
KCl 8g
Mg Cl2·6H2O 2g
CaCl2 2.8g
溶于1000ml双蒸水  
原液 B   
(1) Na2HPO4·12H2O 3.04g
KH2PO4 1.2g
葡萄糖 20.0g
溶于800ml双蒸水  
(2) 0.4%酚红溶液:取酚红0.4g,置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH,并研磨,直至完全溶解,约加0.1N NaOH 10ml。将溶解的酚红吸入100ml量瓶中,用双蒸水洗下研钵中残留酚红液,并入量瓶中,最后补加双蒸水至100ml。
将(1)液和(2)液混合,补加双蒸水至1000ml,即为原液B。
应用液   
原液A 1份
原液B  1份
双蒸水 18份
混合后,分装于200ml小瓶中,10磅高压蒸气灭菌15分钟,临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6
2楼2013-03-29 13:19:24
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axian1

新虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bingge880306 at 2013-03-29 13:19:24
Hanks 液的配制
Hanks 液是生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液(Balanced Salt Solution,BSS ),简称H。主要用于配制配制培养液,稀释剂和细胞清洗液,而不能单独作为细胞,组织培养液。
原液A   
  ...

谢谢!我想问10×Hanks液配方,是不是加液体时浓缩10倍?比方100加成10?做钙流,10×Hanks液+hepes 配制,第一次做 不会配啊 请指教啊
3楼2013-04-02 11:44:42
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bingge880306

银虫 (初入文坛)

关于第一个问题,我觉得原则上可以这么理解,但是担心浓缩会饱和析出吧,不过可以试试,哈哈
HEPES使用方法有两种:

(1)HEPES可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lN NaOH 调pH至7.2,滤过除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10 mmol/L。

(2)亦可配成 100 x 贮存液(l mol/L),使用前取 99ml培养液加入 lml贮存液,最终应用浓度仍为10mmol/L。l mol/L(100 x)HEPES贮存液配制方法:取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中,用lN NaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。
4楼2013-04-12 14:20:25
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