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钥匙环~

银虫 (小有名气)

[求助] 重组载体构建出现瓶颈,希望经验人士可以给予帮助~!!!

我将载体与我的目的片段连接转化得到重组质粒后,进行电泳,目的条带很暗,但是双酶切和单酶切条带都很亮,而且也是我的预期结果,为什么啊!!!!?????

lane 1、2是单酶切结果,3是双酶切结果,4是质粒,5ul的量呢!

Administrator 2013-03-26 17 小时 10 分钟.jpg
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叶自己的叶,花自己的花,结自己的果子,所坚持的也便是生命成自己的生命
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 钥匙环~ at 2013-03-27 08:48:26
4ul加1ulbuf
酶切也是4ul
分子实验太神奇了 郁闷...

这样的确神奇。会不会是提的质粒没有溶解均匀,点质粒样品的时候刚好没吸到质粒。
9楼2013-03-27 12:21:34
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as023

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking: 金币+2, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-26 19:53:25
双酶切相对于单酶切来说它的片段都要小于单酶切,在一定得电泳时间内,小片段相对于大片段来说会比较暗
这就是原因
另外,我真心觉得你的已经够亮了
2楼2013-03-26 19:19:28
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钥匙环~

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by as023 at 2013-03-26 19:19:28
双酶切相对于单酶切来说它的片段都要小于单酶切,在一定得电泳时间内,小片段相对于大片段来说会比较暗
这就是原因
另外,我真心觉得你的已经够亮了

我是想问我的质粒为什么很暗,酶切结果很亮,4孔是质粒
叶自己的叶,花自己的花,结自己的果子,所坚持的也便是生命成自己的生命
3楼2013-03-26 20:08:48
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as023

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你的质粒加的量和酶切的时加的肯定不一样吧
,浓度问题
4楼2013-03-26 22:21:36
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