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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于用lip2000瞬时转染mcf-7/adr 细胞的问题
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nandalina

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于用lip2000瞬时转染mcf-7/adr 细胞的问题 已有1人参与

最近用lipo2000转染mcf-7/adr细胞，转染质粒后测启动子活性，以β-gal来矫正转染效率。但是负对照出现了β-gal活性很低的问题，实验组正常。重复了几次，问题还是存在，不知道什么原因，很着急！望了解的虫友给予帮助，万分感谢！！
                      PGL3             MDR1        MRP1        BCRP
        luc          62        11819        3692        918
               β-gal        0.173        0.336        0.28        0.297
        校正β-gal  0.165     0.328        0.272        0.289
        校正luc        375.7575758  36033.53659        13573.52941        3176.470588
        激活倍数        1                    95.89570219         36.12310246        8.453510435
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1楼 2013-03-25 11:10:15
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czbd2016

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by nandalina at 2013-03-25 11:10:15
最近用lipo2000转染mcf-7/adr细胞，转染质粒后测启动子活性，以β-gal来矫正转染效率。但是负对照出现了β-gal活性很低的问题，实验组正常。重复了几次，问题还是存在，不知道什么原因，很着急！望了解的虫友给予帮 ...

我个人认为是转染试剂出现了问题，可能是你们实验组使用的转染试剂的细胞毒性偏高，我们前一段时间用的RFect转染试剂，用下来效果还不错，主要是细胞转阳性率高，另外就是细胞毒性小。
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2楼2018-11-21 15:18:27
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

MCF-7细胞做瞬转相对比较好做，lipo2000b个人不建议使用，Lipo2000细胞毒性略大，容易导致转染后细胞大量死亡，相比而言我们现在的BIODAI对细胞几乎没有毒性，在转染后也不需要更换培养液
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3楼2020-05-25 09:28:48
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