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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫组织化学(IHC)问题求助
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 免疫组织化学(IHC)问题求助

本人新手，做了大鼠肾脏免疫组织化学的片子，前后2次，检测的抗原是pCNA，用的抗体是ab cam的pCNA抗体，2次结果都是苏木素染色很不明显（苏木精在DAB染色后复染，2min后 水里终止反应1min后再扔进70%的乙醇中中止反应一分钟，期间没有在显微镜下观察，因为没有显微镜，最后观测时才去别的实验室借的显微镜），细胞核染色不明显，也不知道哪些是pCNA, 如图，求助。

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1楼 2013-03-24 14:21:24
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)
背景颜色是不是调的不对？
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3楼2013-03-25 15:16:54
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kelonni

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析 2013-03-27 09:17:10
从你的片子来看，好像是你拍的时候没有白平衡。没有白平衡的话，就会造成拍照的对比颜色不明显。
从你的实验步骤来看， 问题应该不大。苏木素染完后，应该会看到整个的组织片都会泛蓝。应该是很明显的才对。至于pCNA，我不是很了解这个分子。但是Abcam的抗体质量还不错，你可以看下它使用说明书上给出的描述或者染色结果。
先调整下显微镜拍照时的条件吧。
希望对你有帮助！
赞一下 回复此楼
闭关修炼中。。。。
4楼2013-03-26 14:20:41
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