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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 就鉴别双歧杆菌
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星星杨

铜虫 (初入文坛)

[交流] 就鉴别双歧杆菌

哪位大侠做过用16S鉴别双歧杆菌啊？用细菌通用引物能做吗？谢谢！
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1楼 2013-03-20 10:41:51
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星星杨

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
12楼: Originally posted by freerain at 2013-03-21 17:13:26
附件下载不了，我没有装快传

你以适当提高退火温度。
也可以把基因组模板稀释，
减少非特异性扩增

我们鉴定过上百菌株，通用引物没有问题的...

做了个梯度PCR，做出来的也很多条带，除非换引物，可双歧杆菌的引物设计起来好像很麻烦，哎！现在真不知道该怎么办了！
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14楼2013-03-22 08:35:37
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freerain

禁虫 (职业作家)
★
星星杨(金币+1): 谢谢参与
本帖内容被屏蔽
2楼2013-03-20 10:54:41
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星星杨

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by freerain at 2013-03-20 10:54:41
16S 通用引物就可以哈

我这几天在做16S双歧杆菌的鉴定，刚开始跑没条带，后来好不容易有了，可又好多条带，郁闷啊！可否帮我分析一下啊？谢谢啊！条件是：
94度    4分钟
94度   30秒
55度   30秒
72度   2分钟
30个循环
72度  10分钟
梯度PCR也做了，条带也很多，这么办啊？
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  • 附件 1 : 2013.3.16.tif
    • 2013-03-20 16:37:31, 646 K
3楼2013-03-20 16:42:04
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tianhome

木虫 (知名作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
朋友，我没做过鉴定，但理论上讲，用通用引物是没问题的。先试试用刚刚提取出来的基因组作模板，如果还不行，就换个taq酶吧。
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星星杨
7楼2013-03-21 05:42:49
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liwensidun5楼
2013-03-20 17:12   回复  
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