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带你看大海

木虫 (正式写手)

[求助] 无机焦磷酸酶的活性测定

正在做一个酶的活性测定,产物有焦磷酸,需要与无机焦磷酸酶共反应产生磷酸,通过检测磷酸的含量来检测该酶的酶活。。。。
但是。。。。。
作了很多次,磷酸就是没检测到!!重复了n次,条件换了n次。。没用。。。
磷酸是用孔雀绿-钼酸铵法测的。反应buffer中已经加了10mM的Mgcl2,温度是30℃。ph是7.5.
求助。。这个无机焦磷酸酶怎么不干活?
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带你看大海

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 单心娃娃 at 2014-03-12 14:18:48
想问一下你最后测出来没有呀

额~最后换放射性标记了。。
3楼2014-03-13 02:26:24
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单心娃娃

新虫 (初入文坛)

想问一下你最后测出来没有呀
2楼2014-03-12 14:18:48
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单心娃娃

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 带你看大海 at 2014-03-13 02:26:24
额~最后换放射性标记了。。...

测酶都用这么高端的方法?我看好多文献都用的是普通的钼蓝比色法,但是我测出来样品之间吸光度都是一样的~~感觉就是没有这个酶~
4楼2014-03-18 13:50:29
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