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fayzhao金虫 (小有名气)
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摇菌 不浑浊 已有1人参与
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各位好, 目前我正在做的是构建表达载体,我做的是线虫RNAi。 具体步骤是这样的: 双酶切得到正确的目的基因片段,连接到L4440载体,转化到大肠杆菌HT115中,挑单克隆测序,将阳性克隆菌液保存。 遇到的问题是这样的: 首先说明一下LB培养基没有问题(因为同时摇的还有其他菌,且浑浊)。 测序正确的菌液无法摇浑浊。接着我将菌液涂平板以复壮,但是挑到的单菌落还是无法摇浑浊。接下来我将最初转化时涂的平板拿出来(已在4℃保存一周),挑取上面的单菌落摇菌,仍然不能摇浑。 我实在是找不到原因了,无奈啊,希望知道方法的同道帮帮忙啊,O(∩_∩)O谢谢啦 |
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雅典娜1008
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fayzhao
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