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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 高分子生物材料 » EDC-NHS活化羧基进行酰胺反应
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892963128

铜虫 (小有名气)

[交流] EDC-NHS活化羧基进行酰胺反应 已有10人参与

就是用NHS-EDC活化羧基进行酰胺键反应时候，加入胺之后一般需要反应多久呢，怎样反应就终止了呢，我看见有的文献中加入提到氢氧化钠调节pH值为7使得反应终止，你们一般是怎么做的呢？
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1楼 2013-03-18 15:39:14
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cambridge907

金虫 (小有名气)
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黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-03-20 12:31:33
如果是高分子的反应，一般反应1到3天。至于终止反应，一般是将溶液pH调到8以上，然后加入羟氨。这个反应很成熟的，可以到google里搜索下，很多相关公司说明和文献！
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3楼2013-03-20 10:37:19
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xhdyw

木虫 (著名写手)
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9楼: Originally posted by 冰之琴亲 at 2013-07-23 10:31:01
一个高分子材料上的羧基要和一个氨基反应，其中用EDC和NHS进行活化，请问EDC和NHS的量与羧基和氨基的量之间有什么关系？请大神指教...

不是大神... 主要看你材料上羧基和氨基的数量。觉得确保数量充足。EDC和NHS的偶联反应 是先活化羧基，所以你的投料可以按羧基的mol量来。 你在材料上可以投很高的量， 一般有机溶剂中你投个5:5:1啥的都可以，这也跟你的反应的PH有关，一般ph4-6多投料比可以小点，像MES中，反应活性更高点，中性溶剂中PBS之类的，可以适当多投点，多加点NHS的量。在材料表面的话，你算得量之比其实意义不大。你可以投很高的量1000:1000:1都没问题，反正反应物和副产物也是水溶，可以很轻松的清洗掉，edc本身也没毒性。
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10楼2013-07-23 14:18:18
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yalingwu

银虫 (正式写手)
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黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2013-03-20 12:31:18
加入EDC NHS 后活化1.5小时，用PBS缓冲液冲洗
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2楼2013-03-20 09:47:32
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892963128

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cambridge907 at 2013-03-20 10:37:19
如果是高分子的反应，一般反应1到3天。至于终止反应，一般是将溶液pH调到8以上，然后加入羟氨。这个反应很成熟的，可以到google里搜索下，很多相关公司说明和文献！

那如果不调节ph到碱性，就是还是原来反应中的ph，edc活化条件中ph最好是4-6，反应应该也可以自行结束吧？为什么要使反应终止呢？
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4楼2013-03-21 13:36:24
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cambridge907

金虫 (小有名气)
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markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-06-07 20:25:33
引用回帖:
4楼: Originally posted by 892963128 at 2013-03-21 13:36:24
那如果不调节ph到碱性，就是还是原来反应中的ph，edc活化条件中ph最好是4-6，反应应该也可以自行结束吧？为什么要使反应终止呢？...

虽然说EDC和NHS比较容易失活，但是在溶液中存在三天后，应该还有部分没有失活而继续存在活性，这样反应会持续进行。至于反应终止，那就要看你的实验目的是什么了，如果要得到不同取代度的物质，那就要在选择的时间点终止反应，然后纯化产物！当然，要是不care反应反应程度，那就继续让其催化反应吧！
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5楼2013-03-22 08:05:44
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cliang_scau

铜虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by yalingwu at 2013-03-20 09:47:32
加入EDC NHS 后活化1.5小时，用PBS缓冲液冲洗

我是反应40min后离心30min，再置换Buffer。是这样子吗？嘿，
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6楼2013-05-14 20:55:52
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guisiliao

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markar: 金币+1, 感谢回帖交流！ 2013-06-07 20:25:50
看你用的材料吧，如果是纳米粒子之类的话应该在揺床上面比较合适，如果是固体之类的就直接浸泡就可以了，至于时间的话，我当时做的时候是40min到1个小时，然后pH值，我看的文献也说是要调到7，前期我也是这么做的， 不过后来没调到7，对后期的实验也没什么影响，我的是芯片。
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7楼2013-06-07 09:53:11
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xhdyw

木虫 (著名写手)
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红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来生物材料板块应助交流 2013-06-09 11:19:02
这是很常用很成熟的开放的反应 而且没要求那么高的 活化羧基 或者直接一锅煮都行 看你反应了 活化10min 半小时 1小时都有。如果你的羧酸本身如果有氨基啥的 就活化个10min吧，没有的话1h，用MES或者PBS做容易。pH4.5-7都行。
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8楼2013-06-09 09:24:50
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冰之琴亲

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by xhdyw at 2013-06-09 09:24:50
这是很常用很成熟的开放的反应 而且没要求那么高的 活化羧基 或者直接一锅煮都行 看你反应了 活化10min 半小时 1小时都有。如果你的羧酸本身如果有氨基啥的 就活化个10min吧，没有的话1h，用MES或者PBS做容易。pH4. ...

一个高分子材料上的羧基要和一个氨基反应，其中用EDC和NHS进行活化，请问EDC和NHS的量与羧基和氨基的量之间有什么关系？请大神指教
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9楼2013-07-23 10:31:01
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