| 查看: 2214 | 回复: 15 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
ChIP实验 已有2人参与
|
|||
|
本人刚开始做ChIP实验，实验中阴性对照组、不加抗体组和实验组一样都出现了阳性条带，而且Input cotrol样品的条带相对暗很多，现在不知道从哪里分析了，是哪里出了问题？还请各位高手指点 [ Last edited by silicare on 2014-2-26 at 16:34 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 实验求助 |
» 猜你喜欢
ALK5 高选择性小分子 LY-3200882：可放大合成路线与质控要点解析
已经有0人回复
-
AM630（CAS 164178-33-0）：CB2 选择性配体的实验使用与供应要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有286人回复
-
ADC标杆分子T-DM1全解析：从结构设计到实验室应用的技术要点
已经有0人回复
-
HILIC磁珠研究蛋白组学怎么做？
已经有0人回复
-
His标签蛋白纯化怎么才能快？
已经有0人回复
-
WRN变构抑制剂HRO761：从D1/D2界面锁定到MSI合成致死的工具化合物深度解析
已经有0人回复
-
KRAS G12V(ON) 选择性抑制剂 RMC-5127：从三元复合物机制到科研应用
已经有0人回复
-
SHP2 变构抑制剂 Sitneprotafib：从作用机制到科研试剂选型要点
已经有0人回复
-
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
liuxiuaza: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-19 12:25:22
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-21 11:18:31
liuxiuaza: 金币+1 2013-03-22 08:45:44
liuxiuaza: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-19 12:25:22
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-03-21 11:18:31
liuxiuaza: 金币+1 2013-03-22 08:45:44
|
???E???????????]????????}??????????c???????]?????????????w?????IgG???????????????rat?????????rat IgG, ???^?v??@??????????F?l????????????????S?????????magnetic beads???u?u??????y??agarose beads????????????^??Q??chip??????е?????К?????????????????????F??]??phenol chloroform????DNA????????????r?????К??????@??sample?g???`??????????? [ ????????? http://muchong.com/3g ] |
4楼2013-03-19 11:43:13
2楼2013-03-18 21:49:09
|
阴性抗体是用的别的无关抗体，因为阴性抗体组也出现了阳性条带，我不知道是什么原因，就不加抗体也做了一遍，结果也出现了阳性条带，IP我用的是santa Cruz的Protein A/G PLUSAgarose。我是先用1%的甲醛进行交联，然后加甘氨酸终止，加裂解液然后超声，超声后的样品取上清，取一定蛋白浓度的样品加Protein A/G PLUSAgarose进行Preclear除去非特异性的蛋白，离心取上清加抗体过夜，再加Protein A/G PLUSAgarose进行沉淀，对沉淀复合物洗涤后，加洗脱缓冲液洗脱并解交联，离心取得上清是我的样品，然后用酚/氯仿抽提，乙醇沉淀。还请您多多指点，在下先谢过了，不胜感激！ |
3楼2013-03-19 08:53:47
十分感谢您的指点 5楼2013-03-19 12:27:44