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YariS

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问关于Sephadex LH-20的使用

各位高手,最近在用Sephadex LH-20,打算采用反相系统,用甲醇水洗脱,那填料可以用水溶胀吗?如果用甲醇溶胀装柱,上样前是不是需要将柱子用不同浓度的甲醇水(如100%、80%、60%等等)梯度洗至最后用水平衡柱子呀,请各位指教~~
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huangxishan13

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引用回帖:
3楼: Originally posted by YariS at 2013-03-17 11:17:15
谢谢!那如果用甲醇溶胀,是不是就需要梯度平衡柱子呀~~...

如果你洗脱时只需要用甲醇洗脱的,就从甲醇开始吧, 就不需要梯度来平衡.
如果你要从20%开始, 就得要平衡哦
4楼2013-04-10 09:58:52
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huangxishan13

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
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karl2100: 金币+1, 多谢指教! 2013-03-17 11:59:16
YariS: 金币+2, 有帮助 2013-04-09 17:36:26
填料可以用水溶胀,但上柱前可以不用梯度的浓度来洗脱平衡柱子。水溶胀后,直接上柱,然后可以直接拌样上柱,上柱的过程就按20%,40,60,80,100的甲醇梯度洗脱即可。
2楼2013-03-16 15:05:27
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YariS

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by huangxishan13 at 2013-03-16 15:05:27
填料可以用水溶胀,但上柱前可以不用梯度的浓度来洗脱平衡柱子。水溶胀后,直接上柱,然后可以直接拌样上柱,上柱的过程就按20%,40,60,80,100的甲醇梯度洗脱即可。

谢谢!那如果用甲醇溶胀,是不是就需要梯度平衡柱子呀~~
3楼2013-03-17 11:17:15
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necrosiser

铜虫 (小有名气)

请问柱子下游出口处用什么检测呢?紫外线实时检测么?没做过
还是每隔几毫升接个样品,上紫外分光仪全波段扫描?
郁闷啊
终身学习
5楼2013-05-31 11:38:34
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