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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 请问关于Sephadex LH-20的使用
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YariS

新虫 (初入文坛)

[求助] 请问关于Sephadex LH-20的使用

各位高手，最近在用Sephadex LH-20，打算采用反相系统，用甲醇水洗脱，那填料可以用水溶胀吗？如果用甲醇溶胀装柱，上样前是不是需要将柱子用不同浓度的甲醇水（如100%、80%、60%等等）梯度洗至最后用水平衡柱子呀，请各位指教~~
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1楼 2013-03-16 14:54:48
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huangxishan13

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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karl2100: 金币+1, 多谢指教！ 2013-03-17 11:59:16
YariS: 金币+2, ★有帮助 2013-04-09 17:36:26
填料可以用水溶胀，但上柱前可以不用梯度的浓度来洗脱平衡柱子。水溶胀后，直接上柱，然后可以直接拌样上柱，上柱的过程就按20%，40，60，80，100的甲醇梯度洗脱即可。
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2楼2013-03-16 15:05:27
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YariS

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by huangxishan13 at 2013-03-16 15:05:27
填料可以用水溶胀，但上柱前可以不用梯度的浓度来洗脱平衡柱子。水溶胀后，直接上柱，然后可以直接拌样上柱，上柱的过程就按20%，40，60，80，100的甲醇梯度洗脱即可。

谢谢！那如果用甲醇溶胀，是不是就需要梯度平衡柱子呀~~
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3楼2013-03-17 11:17:15
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huangxishan13

捐助贵宾 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by YariS at 2013-03-17 11:17:15
谢谢！那如果用甲醇溶胀，是不是就需要梯度平衡柱子呀~~...

如果你洗脱时只需要用甲醇洗脱的,就从甲醇开始吧, 就不需要梯度来平衡.
如果你要从20%开始, 就得要平衡哦
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4楼2013-04-10 09:58:52
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necrosiser

铜虫 (小有名气)
请问柱子下游出口处用什么检测呢？紫外线实时检测么？没做过
还是每隔几毫升接个样品，上紫外分光仪全波段扫描？
郁闷啊
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终身学习
5楼2013-05-31 11:38:34
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