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hylee103

金虫 (正式写手)

[求助] LAMP相关问题求助 已有2人参与

最近在做病毒的lamp检测,原模板浓度为0.2ug/ul,将模板10倍稀释,稀释到10 -21时,还可以检测到,是不是出现假阳性了?该怎么避免假阳性现象呢?求大家多多指导!
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

★ ★
hylee103(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-05-03 00:29:00
引用回帖:
11楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-05-02 16:29:58
大谢阁下!!我刚P了 ,按照你上面说的 四个配对 都做了。都能P出来 不过有BIP和FIP的都有引物二聚体~~~这个影响不算太大吧...

LAMP的FIP、BIP极易出现引物二聚体,这个正常
都能P出来,那你得看看是不是以下问题:
1.FIP、BIP中的F1c、B1c那个方向对不对---如果是primer explorer设计的话不会错,手工设计的时候有时候会粗心
2.有没有在反应中使用loop引物---有时候设计不理想,灵敏度会很低,这时候往往需要通过延长反应时间或者添加loop引物
3.反应体系是自配还是试剂盒,如果自配的不好就可以试试试剂盒,国产的比鬼子的便宜不少
4.以上都不行,那啥你就换一套吧,这个真没辙了

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

13楼2013-05-03 00:15:00
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119904386

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
hylee103(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-29 14:01:05
lamp极易假阳性,除了注意操作外,只能换用品、换试剂、换枪、换房间了
2楼2013-03-19 07:53:42
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

我是来求助的~~~我的LAMP为什么总也P不出来 去网上找的各种资料 是不是有什么地方不对,LZ可以指教下么?
戒掉安逸 多逼逼自己
3楼2013-04-28 15:27:08
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hylee103

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-04-28 15:27:08
我是来求助的~~~我的LAMP为什么总也P不出来 去网上找的各种资料 是不是有什么地方不对,LZ可以指教下么?

你确定你的引物是否好用了吗?
4楼2013-04-29 12:08:27
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