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hylee103

金虫 (正式写手)

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专业: 病毒学

[求助] LAMP相关问题求助已有2人参与

最近在做病毒的lamp检测，原模板浓度为0.2ug/ul,将模板10倍稀释，稀释到10 -21时，还可以检测到，是不是出现假阳性了？该怎么避免假阳性现象呢？求大家多多指导！

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1楼2013-03-14 20:20:30

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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

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专业: 病毒、病毒感染与宿主免疫

★ ★
hylee103(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2013-05-03 00:29:00

引用回帖:

11楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-05-02 16:29:58

大谢阁下！！我刚P了，按照你上面说的四个配对都做了。都能P出来不过有BIP和FIP的都有引物二聚体~~~这个影响不算太大吧...

LAMP的FIP、BIP极易出现引物二聚体，这个正常
都能P出来，那你得看看是不是以下问题：
1.FIP、BIP中的F1c、B1c那个方向对不对---如果是primer explorer设计的话不会错，手工设计的时候有时候会粗心
2.有没有在反应中使用loop引物---有时候设计不理想，灵敏度会很低，这时候往往需要通过延长反应时间或者添加loop引物
3.反应体系是自配还是试剂盒，如果自配的不好就可以试试试剂盒，国产的比鬼子的便宜不少
4.以上都不行，那啥你就换一套吧，这个真没辙了