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Bella0224

金虫 (小有名气)

[求助] Ri质粒介导的基因转化,构建双元表达载体载体

各位虫友,我现在在做有关于Ri质粒介导的基因转化,看文献一般构建的都是植物双元表达载体

看文库的一篇文章,说双元表达载体包含两部分,一部分是缺失T-DNA区域,主要提供Vir基因,用来激活T-DNA的转移;还有一部分是含T-DNA,成为小Ti

我现在有一个载体,pRI909,购自于Takara,它是缺乏vir基因,来源于Ri质粒,抗性为卡那,表达基因是NPI 111 ,正好是我现在希望做的

那么我是否直接将我的目的基因连接于这个表达载体的MCS区呢?连接完了以后就直接转到农杆菌就能表达么?还是需要再连接别的东西呢?是否还需要找一个含Vir的载体,将Vir区域切下呢?

等将来侵染植物长出毛状根,是否就包含我这个载体呢?

期待虫友们的回复~~
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