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beimi

木虫 (著名写手)

[求助] PGEX4T-1

做了半年了,用了pGEX4T-1载体,蛋白表达,就是做不出来,用了Rossata Gami 也用了,BL21也用了,就是搞不出来,酶切测序都没问题,温度试了,很多,IPTG浓度也是了很多,哎!

就发发牢骚吧,希望下一步换载体,在做不出来,就直接体外合成了!

希望后面换载体,能顺利点!
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无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
beimi: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-10 00:34:50
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:49:55
换载体还是要优先考虑的,我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来,换了个载体就出来了!
3楼2013-03-11 09:16:09
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你可以做个WB检测一下,估计量很少。体外合成得到的量也不多啊。
2楼2013-03-10 22:40:27
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beimi

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-11 09:16:09
换载体还是要优先考虑的,我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来,换了个载体就出来了!

你好,你一开始用的什么载体?后来换的什么载体啊?谢谢
4楼2013-04-10 00:34:38
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