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木虫 (著名写手)

[求助] PGEX4T-1

做了半年了，用了pGEX4T-1载体，蛋白表达，就是做不出来，用了Rossata Gami 也用了，BL21也用了，就是搞不出来，酶切测序都没问题，温度试了，很多，IPTG浓度也是了很多，哎！

就发发牢骚吧，希望下一步换载体，在做不出来，就直接体外合成了！

希望后面换载体，能顺利点！

1楼 2013-03-10 22:23:39

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捐助贵宾 (职业作家)

感谢参与，应助指数 +1

你可以做个WB检测一下，估计量很少。体外合成得到的量也不多啊。

2楼2013-03-10 22:40:27

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铁虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
beimi: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-10 00:34:50
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:49:55

换载体还是要优先考虑的，我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来，换了个载体就出来了！

3楼2013-03-11 09:16:09

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木虫 (著名写手)

引用回帖:

3楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-11 09:16:09
换载体还是要优先考虑的，我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来，换了个载体就出来了！

你好，你一开始用的什么载体？后来换的什么载体啊？谢谢

4楼2013-04-10 00:34:38

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