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beimi

木虫 (著名写手)

[求助] PGEX4T-1

做了半年了，用了pGEX4T-1载体，蛋白表达，就是做不出来，用了Rossata Gami 也用了，BL21也用了，就是搞不出来，酶切测序都没问题，温度试了，很多，IPTG浓度也是了很多，哎！

就发发牢骚吧，希望下一步换载体，在做不出来，就直接体外合成了！

希望后面换载体，能顺利点！
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1楼 2013-03-10 22:23:39
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biosci

捐助贵宾 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你可以做个WB检测一下，估计量很少。体外合成得到的量也不多啊。
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2楼2013-03-10 22:40:27
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无为书生

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
beimi: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-04-10 00:34:50
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-10 08:49:55
换载体还是要优先考虑的，我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来，换了个载体就出来了！
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3楼2013-03-11 09:16:09
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beimi

木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 无为书生 at 2013-03-11 09:16:09
换载体还是要优先考虑的，我当初表达一个单增李斯特的毒性蛋白也是表达不出来，换了个载体就出来了！

你好，你一开始用的什么载体？后来换的什么载体啊？谢谢
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4楼2013-04-10 00:34:38
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