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小花木兰

银虫 (小有名气)

[交流] 电泳常见问题

跑SDS-凝胶电泳。经常会出现一个现象，就是在同一块胶上，不同的的蛋白样品，使用同一样缓冲液处理，加热煮沸时间，离心等条件都一样，但跑结果是，有的蛋白目标蛋带条清析，而有的蛋白目标蛋白却不清析。为什么
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1楼 2013-03-06 22:34:14
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chenguestc

木虫 (职业作家)
★
小花木兰(金币+1): 谢谢参与
样品在最开始提取时就出现问题，例如样品颗粒大小不同或粉末多少不一致加入相同体积提取液造成有的提取充分，有的部分提取，其次，胶制作不均匀。前者可能性较大。
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2楼2013-03-07 09:41:04
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l68266152

银虫 (小有名气)
★
小花木兰(金币+1): 谢谢参与
蛋白来源是什么？有没有可能是不均用修饰造成的？比如糖基化。
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3楼2013-03-07 09:52:40
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
上样多、样品盐浓度高、有尿素、DTT、Triton等都会影响
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4楼2013-03-07 10:18:06
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
应该和样品有关吧。亲水性蛋白的变性比较完全，电泳出来一般是条带清晰，很sharp。疏水性强的蛋白一般变性困难，跑出来就是比较diffuse的，很多跨膜结构多的膜蛋白就是这样的。
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5楼2013-03-07 10:22:27
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无为书生

铁虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我感觉应该是你初始的蛋白量不一致
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6楼2013-03-07 10:23:18
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