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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 高分子 » 高分子化学 » 求助多糖GPC图分析？
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七AND七

银虫 (小有名气)

[求助] 求助多糖GPC图分析？

下图为我的纯化得到的多糖的GPC图，但是不怎么会分析，请各位帮忙分析一下这个分离图怎么样？分离图中出现的尖峰是什么原因呢？能说明我的样品纯度怎么样？

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1楼 2013-03-06 17:34:46
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love-study

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
分离图是从什么地方分离开的；你的中间的尖峰好像是个倒峰，没有表现完全；纵坐标应该在向下显示；看看下面的是不是峰；
中间的图是分子量分布图；告诉你多糖是多种分子量的混合物，并且各种分子量所占的比例；
最后一个附图是校正曲线；告诉了你所能测得聚合物上下线；
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学海无涯
2楼2013-03-06 18:16:49
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七AND七

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by love-study at 2013-03-06 18:16:49
分离图是从什么地方分离开的；你的中间的尖峰好像是个倒峰，没有表现完全；纵坐标应该在向下显示；看看下面的是不是峰；
中间的图是分子量分布图；告诉你多糖是多种分子量的混合物，并且各种分子量所占的比例；
最 ...

您好!图中样品峰后边的尖峰与倒峰是不是GPC独有的溶剂峰呢，我看有人说GPC的溶剂峰都有一个正负峰。是不是我的样品峰和溶剂峰有点重叠  所以就成这样了？还有就是从这个分离图和分子量分布图能看出我的样品的纯度怎么样呢？
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3楼2013-03-06 19:50:18
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love-study

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 七AND七 at 2013-03-06 19:50:18
您好!图中样品峰后边的尖峰与倒峰是不是GPC独有的溶剂峰呢，我看有人说GPC的溶剂峰都有一个正负峰。是不是我的样品峰和溶剂峰有点重叠  所以就成这样了？还有就是从这个分离图和分子量分布图能看出我的样品的纯度怎 ...

恩；应该是溶剂峰；还有就是你的实验条件很不稳定，基线不平；
另外溶剂峰也很不标准可能是你使用的溶剂纯度不是太好吧；
从分离图看不出你的纯度怎么样；GPC只能给出分子量以及分子量分度；
给不出聚合物纯度的关系；
样品峰和溶剂峰是有点重叠
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学海无涯
4楼2013-03-06 20:05:23
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七AND七

银虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by love-study at 2013-03-06 20:05:23
恩；应该是溶剂峰；还有就是你的实验条件很不稳定，基线不平；
另外溶剂峰也很不标准可能是你使用的溶剂纯度不是太好吧；
从分离图看不出你的纯度怎么样；GPC只能给出分子量以及分子量分度；
给不出聚合物纯度的 ...

谢谢你！我们的流动相是0.1 N PB （pH 6.8）(磷酸盐缓冲液)  
Mn        Mw        Mz        Mw/Mn
1.35E+04        7.72E+04        4.65E+05        5.74E+00

一般主要看重均分子量约为7万多，我的理解是分离图中我的样品峰为一个算是比较对称的单峰，说明我多糖分子量分布还算比较均匀吧。我的主要目的就是通过纯化得到分子量较集中的样品
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5楼2013-03-06 21:00:16
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love-study

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
七AND七: 金币+5 2013-03-06 21:36:21
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5楼: Originally posted by 七AND七 at 2013-03-06 21:00:16
谢谢你！我们的流动相是0.1 N PB （pH 6.8）(磷酸盐缓冲液)  
Mn        Mw        Mz        Mw/Mn
1.35E+04        7.72E+04        4.65E+05        5.74E+00

一般主要看重均分子量约为7万多，我的理解是分离图中我的样品峰为一个算是比较对称的单峰， ...

对，是比较对称；不过由于聚合物峰和溶剂峰重合；聚合物分子量和分布失真；由于少了低分子量的部分，比实际偏大，分布也偏大；
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学海无涯
6楼2013-03-06 21:31:37
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七AND七

银虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by love-study at 2013-03-06 21:31:37
对，是比较对称；不过由于聚合物峰和溶剂峰重合；聚合物分子量和分布失真；由于少了低分子量的部分，比实际偏大，分布也偏大；...

恩  这是实验的问题，只能再换换条件做一些  将样品峰和溶剂峰分开，得出的数据才较真实
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7楼2013-03-06 21:36:07
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