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chenxi3099铁虫 (小有名气)
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关于ZipTip C18微量层析柱使用方法
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| 请教各位，有谁用过ZipTip C18微量层析柱？对蛋白样品纯化浓缩、脱盐等预处理，以便进行质谱分析。。可以直接用移液枪操作吗？谢谢~ |
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coelicolor
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【答案】应助回帖
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lovibond: 金币+2, 鼓励新虫应助 2013-03-12 14:50:47
hsd3521: 应助指数+1 2013-03-13 18:56:32
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Zip-Tip C18除盐方法 准备试剂：ACN，50% ACN（ddH2O稀释），0.1% TFA 1、 用ACN洗涤Tip 3-5次，除去杂质 2、 用0.1% TFA洗涤Tip 5-10次，平衡 3、 用20 uL 0.1% TFA溶解抽干的肽段（或酶切后的肽段溶液），Tip反复吹吸20次，让肽段充分吸附到Tip上 4、 用0.1% TFA洗涤Tip 3-5次，除去未结合的杂质 5、 在新EP管内加入20 uL 50% ACN，Tip反复吹吸10次，洗脱Tip结合的肽段 6、 用ACN反复洗涤Tip10次，除去所有杂质，让Tip再生。从步骤2开始进行新样品除盐 7、 如果进行MALDI-TOF分析，在步骤5后可直接用MATRIX将肽段洗脱到点样板上；如果进行LC-MS/MS分析，将步骤5产生的肽段旋干，再用0.1% 甲酸溶解 注：每只Tip可处理3个样品 另：直接用移液器操作，和小白枪头一样使用。或者跟中黄色的枪头一样。 |
2楼2013-03-12 14:45:22
chenxi3099
铁虫 (小有名气)
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