应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超滤更换buffer时损失非常大
51/1返回列表
查看: 3227  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

haniel01

铜虫 (初入文坛)

[求助] 超滤更换buffer时损失非常大

如题，用超滤管更换buffer,原来是tris缓冲液的pH是7.9要换成7.2的PBS缓冲液，每次超滤完后损失都将近70%蛋白都没有了，流出液中也没有就是吸附在膜上也弄不下来非常的烦恼蛋白得来不易啊有没有什么办法解决这个问题呢？求助求助啊
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-03-06 11:11:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励交流经验 2013-03-06 17:07:34
所以很多时候，我宁可通过透析来换缓冲液，几乎没啥损失。要是非得用超滤的话，你最后是倒过来低速离心下来的？还是不倒过来，直接吸取上面的液体的？那种可以倒过来低速离心取得最终样品的还好一些。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haniel01
3楼2013-03-06 14:01:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

xiaomai1215

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2013-03-06 17:07:24
70%太大了
1.是不是蛋白的总量就比较少，损失大
2.注意蛋白的等电点等性质，更换过程中，蛋白是否发生了聚集沉淀，要经常混匀避免底部浓度过大
3.使用低吸附超滤膜
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

haniel01
2楼2013-03-06 13:15:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haniel01

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaomai1215 at 2013-03-06 13:15:59
70%太大了
1.是不是蛋白的总量就比较少，损失大
2.注意蛋白的等电点等性质，更换过程中，蛋白是否发生了聚集沉淀，要经常混匀避免底部浓度过大
3.使用低吸附超滤膜

总量不算少吧 本来有3mg多的蛋白 超滤完后1mg都没有了，底部浓度过大的话是会吸附在膜上吗？我用的是millipore的，不过不是新的用过几次了跟这个有关系吗？谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2013-03-06 14:03:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

haniel01

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by gaojuan1985 at 2013-03-06 14:01:44
所以很多时候，我宁可通过透析来换缓冲液，几乎没啥损失。要是非得用超滤的话，你最后是倒过来低速离心下来的？还是不倒过来，直接吸取上面的液体的？那种可以倒过来低速离心取得最终样品的还好一些。

不能倒过来离心，就是直接取上面的液体我都有吸打，用透析袋换的话是不是还要换液几次啊？没有做过这个
赞一下 回复此楼
5楼2013-03-06 14:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭