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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白纯化

我用镍柱纯化下来的蛋白在冻融一两次后，大部分蛋白就发生沉淀了，这是为什么？有方法避免吗？
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1楼 2013-03-02 15:21:01
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
冻存蛋白之前，透析咪唑了没？我发现蛋白样品中存在咪唑的时候，冻融会加剧蛋白的絮状沉淀。因此建议你除掉咪唑，加5%甘油，液氮速冻。同时，我都是分装保存，每次拿出来一小管用，减少冻融次数。
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8楼2013-03-05 09:30:37
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jiangyhai

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加5-50%的甘油试试。
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静心做事。
2楼2013-03-02 20:52:49
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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jiangyhai at 2013-03-02 20:52:49
加5-50%的甘油试试。

为什么会沉淀呢？跟咪唑浓度有关吗？
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3楼2013-03-03 09:45:25
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崔士元

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白反复冻融会不会失活？蛋白失活应会沉淀吧
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男人，就要对自己狠一点！
4楼2013-03-03 14:06:18
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