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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 蛋白纯化

我用镍柱纯化下来的蛋白在冻融一两次后，大部分蛋白就发生沉淀了，这是为什么？有方法避免吗？

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1楼 2013-03-02 15:21:01

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zyx335588

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引用回帖:

5楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-03-04 11:37:48
我是用原核表达系统表达的蛋白，本身就没有活性呀。...

蛋白的保存有很多方法，依蛋白的性质不同，其是否能够冻存也不一定，这都需要试验来摸索，。某些蛋白有可能在冻存过程中发生了结构的变化，产生你说的沉淀现象，建议你加一些甘油试试，如果还不行则建议你换用其他保存方式。各种方法保存后后的蛋白活性如何这也需要与新鲜的蛋白样品做活性对照试验。
另外，除非你确定你的蛋白需要翻译后修饰等才有活性，否则不能给笼统的说元和表达的蛋白都没有活性。现在的好多试验用蛋白样品都是通过原核表达获得的，包扩一些生物医药产品。