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jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 0.3
帖子: 46
在线: 19.4小时
虫号: 1547536
注册: 2011-12-22
专业: 病毒学

[求助] 蛋白纯化

我用镍柱纯化下来的蛋白在冻融一两次后，大部分蛋白就发生沉淀了，这是为什么？有方法避免吗？

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1楼 2013-03-02 15:21:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

应助: 565 (博士)
金币: 2140
散金: 687
红花: 15
帖子: 3298
在线: 551.8小时
虫号: 1292024
注册: 2011-05-11
性别: GG
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jiapingshk: 金币+10, ★有帮助 2013-03-04 16:24:41

蛋白一般是不稳定的，需要低温保存，温度越低，保存的时间久越长，而反复冻融会使蛋白质结构被破话。
甘油可以降低体系的极性，体系的极性降低了，有助于蛋白结构稳定；第二，甘油可以降低体系的凝固点，这样利于蛋白在低温下保存，如果不加甘油的话，蛋白反复冻融数次就会失活，甚至变性
同样能够起到保护作用的保护剂还有很多，吐温20、一些氨基酸等等