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qinax1505

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用甲基化，是降解后用用的GC-MS测得
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如果有来生,要做一棵树,站成永恒,没有悲欢的姿势。一半在坚土里安详,一半在清风里飞扬,一半洒落阴凉,一半沐浴阳光。非常沉默,非常骄傲,从不依靠,从不寻找!
11楼2013-03-04 08:54:54
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木头妮子

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by qinax1505 at 2013-03-04 08:54:54
我用甲基化，是降解后用用的GC-MS测得

我也用这种方法，可是甲基化总是有一点羟基峰在上面
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12楼2013-03-04 11:00:16
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木头妮子

铜虫 (小有名气)
怎么没人赐教了呀？
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13楼2013-03-07 08:23:04
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
树树8013: 回帖置顶 2013-03-09 19:42:22
树树8013: 金币+3, 应助指数+1, 谢谢专家解答交流 2013-03-09 19:42:42
木头妮子: 金币+2, ★有帮助 2013-03-11 08:24:50
甲基化确实很难完全，需要多次进行甲基化反应，而且甲基化反应的试剂应该毒性不小，实验时需要注意。另外，甲基化的方法也有多种，在张维杰老师的糖复合物生化研究技术（大概是这个名）这本书上有各种甲基化的方法，后来的文献中出现了一些改进的甲基化方法，你可以选出最适合的方法试试。还有一个需要注意的是，在很多反应中，样品都不能含水，加入的试剂中也不要带入水分。如果先将多糖水解成寡糖，然后再甲基化也许会容易一些。总之，甲基化确实不太容易。祝好运！
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14楼2013-03-07 17:51:47
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wujia115

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

树树8013: 回帖置顶 2013-03-09 19:42:46
上面说的甲基化是用来测定糖苷键连接方式的。如果只是测定单糖组成，只需水解成单糖，接上紫外吸收基团然后液相就可以了，或者酯化后GC分析。测定单糖组成应该要容易得多。
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15楼2013-03-07 17:55:10
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木头妮子

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by wujia115 at 2013-03-07 17:55:10
上面说的甲基化是用来测定糖苷键连接方式的。如果只是测定单糖组成，只需水解成单糖，接上紫外吸收基团然后液相就可以了，或者酯化后GC分析。测定单糖组成应该要容易得多。

嗯嗯，是的，我两个都要测，我将多糖用TFA水解后就去测HPLC了，关于甲基化的问题，就是不能完全取代，不知道是不是个人操作问题。请问你的糖结构做得怎样？
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16楼2013-03-11 08:21:51
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木头妮子

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
14楼: Originally posted by wujia115 at 2013-03-07 17:51:47
甲基化确实很难完全，需要多次进行甲基化反应，而且甲基化反应的试剂应该毒性不小，实验时需要注意。另外，甲基化的方法也有多种，在张维杰老师的糖复合物生化研究技术（大概是这个名）这本书上有各种甲基化的方法， ...

如果先水解了，再甲基化，那岂不是不能判断连接方式啦？
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17楼2013-03-11 08:23:20
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木头妮子

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by qinax1505 at 2013-03-04 08:54:54
我用甲基化，是降解后用用的GC-MS测得

结果怎样？
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18楼2013-03-11 08:24:09
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wangdandelia

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dnazyme at 2013-03-03 20:21:17
先用IR确定甲基化完全。

请问IR是什么意思呢？我也不确定自己的糖水解后样品是否完全硅烷化了。
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19楼2014-01-15 23:27:15
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dnazyme

捐助贵宾 (知名作家)

老虫
引用回帖:
19楼: Originally posted by wangdandelia at 2014-01-15 23:27:15
请问IR是什么意思呢？我也不确定自己的糖水解后样品是否完全硅烷化了。...

infrared spectroscopy
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博坊生物
20楼2014-01-15 23:40:53
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