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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

[求助] 转染时细胞融合度一定要达到60%到80的融合度吗?

我想做个增殖曲线图,分别测0,24,48,72h的细胞数目(MTT法)。但是如过果等到细胞融合度达到60%到80%时再转染的话。48h细胞的数目已经很多了,更别提72h了,根本没法测,或者测出来不准了,如果不等到细胞达到60%到80%融合度时转染,细胞转染后会死很多。各位大虾有什么高见没啊。郁闷并求助中。
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keepon
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2013-03-07 22:44:45
那您觉得在6孔板里转染后多长时间再转到96孔板里面呢?我是做的瞬转噢。...

曾经做过转染完24h后,消化,计数,重新铺在96孔板,分不同时间的!
寻找真正的自我!
8楼2013-03-08 08:54:52
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zhlf1989513: 金币+2, ★有帮助 2013-03-04 17:42:18
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-03-10 10:29:58
如果用96孔板做增殖的话,不需要考虑融合率,细胞数5000-10000(根据细胞生长速率选择);
如果先在6孔板转染再转移到96孔板的话,再根据细胞生长速率,选择低点的融合率,可以摸索一下,比如50%;
寻找真正的自我!
2楼2013-03-02 09:51:21
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhs521521 at 2013-03-02 09:51:21
如果用96孔板做增殖的话,不需要考虑融合率,细胞数5000-10000(根据细胞生长速率选择);
如果先在6孔板转染再转移到96孔板的话,再根据细胞生长速率,选择低点的融合率,可以摸索一下,比如50%;

兄台,有啥好的建议没?要做一个增殖曲线图的话。。。
keepon
3楼2013-03-04 17:56:01
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lhs521521

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我觉得肯定有一个点适合转染,因为对你的细胞不了解,还需要你自己摸索!
不过你可以早上铺板,下午转染;或晚上晚点铺板,早上早点转染;
寻找真正的自我!
4楼2013-03-05 08:39:24
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