应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！
52/1返回列表
查看: 4235  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

格子和潇潇

铜虫 (小有名气)

[求助] Western Blot结果 条带中间 不见了，请教高手！

第一次A样本，用B抗体曝光如下图：


第二次B样本，用同样的B抗体曝光出现了2条带，好像是中空的，两次的二抗浓度都是一样的，都是1:5000，可能是有些高，但是为啥第一次曝光就没事呢？


请教各位高手
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-02-01 22:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaozhenjun

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

蛋白上样量是多少呢，曝光时间还是有很大的影响的。一般凝胶成像系统不是一次可以曝很多张照片嘛
赞一下 回复此楼
12楼2013-04-08 15:18:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析，欢迎交流 2013-02-03 09:32:08
问题可能有两种情况：
一：本身应该是一条带，由于电泳、转膜或者暴光胶片等原因，出现两条带。
二：抗体识别分子量接近的两条带，第一次由于抗体过强或者是电泳的原因，两条带没有分开。
我感觉第二种情况的可能性更大一些。
赞一下 回复此楼
2楼2013-02-02 12:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

格子和潇潇

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-02-02 12:12:22
问题可能有两种情况：
一：本身应该是一条带，由于电泳、转膜或者暴光胶片等原因，出现两条带。
二：抗体识别分子量接近的两条带，第一次由于抗体过强或者是电泳的原因，两条带没有分开。
我感觉第二种情况的可能 ...

一抗为单克隆抗体，本身应该为一条带；
电泳、转膜都没问题，其他一起的内参背景较浓，很可能是二抗浓度大或者没洗好的原因；
曝光时间短或者长都是这个情况；
马上要回家了，也来不及验证了
赞一下 回复此楼
3楼2013-02-02 12:53:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-02-03 09:33:55
第一次的曝光时间太长了
曝光要在看的出各泳道差异的情况下尽量浅一些
第二次的没问题
可能是抗体特异性/蛋白异构体/降解/修饰 各种原因
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-02-02 20:31:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 科研孤儿太难了 +16 我4大白菜 2026-08-20 17/850 2026-08-21 19:07 by sakuraai
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低？主要原因有哪些？ +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭