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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 氨基酸DABS-Cl柱前衍生HPLC测定

请教各位做氨基酸检测用的是什么检测方法啊?最近用DABS-Cl柱前衍生,总是衍生不好,用的美国药典的方法,大致如下:样品溶于50mM的碳酸氢钠溶液,衍生试剂是1.3mg DABS-Cl溶于1ml乙腈,终止液是50mM  ph  7.0 的磷酸钠缓冲液与乙醇1:1混合,流动相为 A--25mM醋酸钠(ph6.5)含DMF4%,B--乙腈。
衍生步骤:取20ul样品溶液于离心管中,加40ul DABS-Cl,70℃水浴加热10min,期间不断摇匀,最后加60ul终止液。
液相条件:岛津液相,波长 436nm,柱子  4.6×150mm,温度40℃,流速1ml/min,0-20min 流动相A 85%,20-32 流动相A 60%,32-34流动相A 30%。

附件为美国药典原文,不知道是理解错误还是哪里的问题,柱子可能不对,药典用的250mm的柱子,请各位帮忙看看,谢了!!!还有一篇也照着做过,也没做出来,希望大家给指导下........[ 来自科研家族 生物医药家族 ]
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
liuliancy: 金币+3, 有帮助, 多多指教 2013-01-28 09:32:13
你也是检验氨基酸吗,如果是,并且按中文的方法做了,没做出来,那你看一下设备是否有问题,设备的系统适用性,做了没?再就是看一下溶液有没有问题。如果这两个都没问题,也有可能是样品的问题。
dasheng1980
2楼2013-01-27 11:36:48
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dasheng1980 at 2013-01-27 11:36:48
你也是检验氨基酸吗,如果是,并且按中文的方法做了,没做出来,那你看一下设备是否有问题,设备的系统适用性,做了没?再就是看一下溶液有没有问题。如果这两个都没问题,也有可能是样品的问题。

这两个都做了,都没做出来,中文的那个没问题吧?衍生方法是对的吗?设备是岛津的,C18柱子,溶液也都是新配的应该没问题啊,不过您倒提醒了我,会不会是衍生上去没被冲下来保留在柱子上了呢?买的标准氨基酸都没衍生上。希望您能再给点指导
3楼2013-01-28 09:31:45
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

http://www.docin.com/p-270771064.html
看看这个对你有没有什么帮助,你这个我也不大懂!不好意!没做过
dasheng1980
4楼2013-06-29 13:20:39
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by dasheng1980 at 2013-06-29 13:20:39
http://www.docin.com/p-270771064.html
看看这个对你有没有什么帮助,你这个我也不大懂!不好意!没做过

谢谢啊.......
5楼2013-06-29 15:14:56
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