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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 氨基酸DABS-Cl柱前衍生HPLC测定
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 氨基酸DABS-Cl柱前衍生HPLC测定

请教各位做氨基酸检测用的是什么检测方法啊？最近用DABS-Cl柱前衍生，总是衍生不好，用的美国药典的方法，大致如下：样品溶于50mM的碳酸氢钠溶液，衍生试剂是1.3mg DABS-Cl溶于1ml乙腈，终止液是50mM  ph  7.0 的磷酸钠缓冲液与乙醇1:1混合，流动相为 A--25mM醋酸钠（ph6.5）含DMF4%，B--乙腈。
衍生步骤：取20ul样品溶液于离心管中，加40ul DABS-Cl，70℃水浴加热10min，期间不断摇匀，最后加60ul终止液。
液相条件：岛津液相，波长 436nm，柱子  4.6×150mm，温度40℃，流速1ml/min，0-20min 流动相A 85%，20-32 流动相A 60%，32-34流动相A 30%。

附件为美国药典原文，不知道是理解错误还是哪里的问题，柱子可能不对，药典用的250mm的柱子，请各位帮忙看看，谢了！！！还有一篇也照着做过，也没做出来，希望大家给指导下........[ 来自科研家族 生物医药家族 ]
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1楼 2013-01-26 11:50:39
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liuliancy: 金币+3, ★有帮助, 多多指教 2013-01-28 09:32:13
你也是检验氨基酸吗，如果是，并且按中文的方法做了，没做出来，那你看一下设备是否有问题，设备的系统适用性，做了没？再就是看一下溶液有没有问题。如果这两个都没问题，也有可能是样品的问题。
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dasheng1980
2楼2013-01-27 11:36:48
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dasheng1980 at 2013-01-27 11:36:48
你也是检验氨基酸吗，如果是，并且按中文的方法做了，没做出来，那你看一下设备是否有问题，设备的系统适用性，做了没？再就是看一下溶液有没有问题。如果这两个都没问题，也有可能是样品的问题。

这两个都做了，都没做出来，中文的那个没问题吧？衍生方法是对的吗？设备是岛津的，C18柱子，溶液也都是新配的应该没问题啊，不过您倒提醒了我，会不会是衍生上去没被冲下来保留在柱子上了呢？买的标准氨基酸都没衍生上。希望您能再给点指导
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3楼2013-01-28 09:31:45
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)

大圣
http://www.docin.com/p-270771064.html
看看这个对你有没有什么帮助，你这个我也不大懂！不好意！没做过
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dasheng1980
4楼2013-06-29 13:20:39
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liuliancy

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dasheng1980 at 2013-06-29 13:20:39
http://www.docin.com/p-270771064.html
看看这个对你有没有什么帮助，你这个我也不大懂！不好意！没做过

谢谢啊.......
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5楼2013-06-29 15:14:56
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