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bbhgchina

铁虫 (初入文坛)

[求助] 材料表面细胞活性怎么衡量

各位兄弟姐妹们, (之前发信问了几个牛人同学,都没有回,无意冒犯,但是这个问题还比较急,现在卡着我,所以又发帖来咨询一下)请教一下关于生物细胞试验的一个问题,(非生物专业,只在网上搜索过MTT相关内容)望不吝赐教。

我的目标是观测一种材料表面形态对细胞的影响。 初步设计的试验方案是在实验组和对照组材料上面分别培养细胞,一定时间后(24h,48h,72h)对比两边细胞的差异。
现在的问题是 由于不是生物专业,不知道用什么方法来 对比两组细胞,甚至不知道培养何种细胞比较好。   我目前的想法是 1. 用电镜直接观看细胞形态变化 /粘附 2. 测量活细胞密度(不知道怎么测) 3. MTT 分析细胞活性
否麻烦大家给点建议
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
红舟流星: 金币+5, BM-EPI+1, http://emuch.net/bbs/viewthread.php?tid=5464228投票通过~ 2013-01-26 17:33:55
引用回帖:
10楼: Originally posted by bbhgchina at 2013-01-24 19:36:19
Actually I am planning to bring down the surface topography to nano meter scale, to explore the details how surface structure affect cells.

I have read couple dozens of articles, they observed th ...

sounds interesting! wish u good luck.
you'd better have more discussion with biologists, especially with a developmental biology background or cell biology, to design a suitable but valuable model to study (cell type, influencing factor...)

Here is one about nanotopographic influences:

1.        McMurray, R. J.; Gadegaard, N.; Tsimbouri, P. M.; Burgess, K. V.; McNamara, L. E.; Tare, R.; Murawski, K.; Kingham, E.; Oreffo, R. O. C.; Dalby, M. J., Nanoscale surfaces for the long-term maintenance of mesenchymal stem cell phenotype and multipotency. Nat Mater 2011, 10, (8), 637-644.
格物致知,知行合一
11楼2013-01-24 21:01:26
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bbhgchina

铁虫 (初入文坛)

好像问题太模糊了。再增加点描述

想对比 经过处理的材料表面形态,比如说 表面沟槽, 洞,突起 等等 对细胞的增值,粘附,活性的影响; 对照组就是一个 ‘平板’
2楼2013-01-24 00:45:39
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
红舟流星: 金币+2, 专家考核, 欢迎来到生物功能材料板块积极应助交流 2013-01-24 04:34:02
ATP analysis could be used to measured the loss in viability because a decrease in ATP production can be linked
to a decrease in cell number.

Specifically, ATP could be quantified by measuring the light produced through ATP's reaction with a naturally occurring firefly enzyme-Luciferase using a luminometer. The amount of light produced corresponds proportionally to the amount of live cells present in the sample.
格物致知,知行合一
3楼2013-01-24 01:03:24
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aircraftvip

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖


markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流! 2013-01-25 12:23:20
Are u using multipotent cells like hMSCs?
if yes, you could try high-content imaging (see the proliferation) and immunofluorescence Staining (see the expression of alkaline phosphatase (ALP), a marker for early osteogenic differentiation)
格物致知,知行合一
4楼2013-01-24 01:55:37
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