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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 帮忙看看这是不是被污染了啊？
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神话米亚

新虫 (初入文坛)

[求助] 帮忙看看这是不是被污染了啊？

我是做昆虫肠道菌的，具体做法是将虫子解剖取出肠道进行研磨，然后稀释倒平板。虫子是用三种方法喂养：1从幼虫开始喂食浸泡抗生素的叶片，2幼虫开始喂浸泡清水的叶片，3实验室一般的喂养，不做任何处理。这样涂完平板后基本出现的情况是：1完全不长菌（也没有杂菌）2长了一些菌（也没啥杂菌）3很多菌，也很杂，没法判断是不是被污染
我就是不能判断是本来应该就是这样还是被污染了，但是如果是污染的那为什么1和2的污染就几乎没有，而3的污染那么严重

15只室内虫 LB  6.JPG



15只室内虫 LB  7.JPG



15只室内虫 LB  9.JPG



15只室内虫 LB 10.JPG



12-3.JPG



9-2.JPG



8.JPG
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1楼 2013-01-23 22:14:10
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

神话米亚

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-01-24 08:54:31
确定污染，鉴定完毕！

第五个图应该就是没有污染的吧
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5楼2013-01-24 10:34:50
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
神话米亚: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-24 11:20:13
引用回帖:
7楼: Originally posted by 神话米亚 at 2013-01-24 10:54:03
我是研究昆虫的，肠道菌只是我研究的一部分，我是想看看肠道菌群改变对昆虫的生长发育什么的会不会有影响，涂平板只是要看看喂抗生素后昆虫肠道菌群是否有被改变了。事实上变化是很明显的，就是抗生素组的平板非常 ...

听你说的这样应该是抗生素确实对昆虫有作用，但是从平板来看，以往像这样一片一片的有好几种菌基本都是染的杂菌，主要是经验，像操作过程（稀释梯度是否设计好），样品问题或者培养期间等都可能出现，一般方法就是要设计好阴性对照，比如稀释样品的液体涂布作为阴性对照，平行之间是否相同菌落生长，再就是实验重建性好不好这几个方面吧。楼主可以自己对照看看。
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聪明才智要为意外做准备~~
8楼2013-01-24 11:12:21
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billtsu

木虫 (正式写手)

木木

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
神话米亚: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-24 19:33:22
1.染菌不太确定,注意要做多个梯度稀释
2.貌似板子长的时间有点久了(连成片的那几个),建议长得能挑菌落了就放四度保存,
3.不知道研磨肠道那步实验你是怎么操作的,反正那一步是应该加上一个空白对照的(排除操作污染)
4.个人感觉肠道微生物种群数量级不应该是这样的(但没仔细研究过),建议使用以下CDM培养基或者其他的培养基试试
5.培养条件,氧气含量,温度怎样设定的(肠道环境不太好说).
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啊木
11楼2013-01-24 17:47:01
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普通回帖

丽羽寒梅

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
神话米亚: 金币+1, ★有帮助 2013-01-24 11:20:56
从图片看可以确定是被污染了，因为从培养基中看到不同的菌落，呈油状的。
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能认识你们是我的荣幸！
2楼2013-01-23 23:06:03
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
确定污染，鉴定完毕！
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IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
3楼2013-01-24 08:54:31
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神话米亚

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 丽羽寒梅 at 2013-01-23 23:06:03
从图片看可以确定是被污染了，因为从培养基中看到不同的菌落，呈油状的。

细菌的菌落都要相同的吗？
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4楼2013-01-24 10:34:09
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得可以把单菌落比较好的先再纯化一下，保藏，等再做一次的时候分离好后看看是不是同一种，对于第一张到第四张一片一片的很有可能是污染，可以比较一下看看这几个板子是不是染的同一种菌。
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聪明才智要为意外做准备~~
6楼2013-01-24 10:41:49
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神话米亚

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-24 10:41:49
我觉得可以把单菌落比较好的先再纯化一下，保藏，等再做一次的时候分离好后看看是不是同一种，对于第一张到第四张一片一片的很有可能是污染，可以比较一下看看这几个板子是不是染的同一种菌。

我是研究昆虫的，肠道菌只是我研究的一部分，我是想看看肠道菌群改变对昆虫的生长发育什么的会不会有影响，涂平板只是要看看喂抗生素后昆虫肠道菌群是否有被改变了。事实上变化是很明显的，就是抗生素组的平板非常干净，完全没被污染（没有贴上图），但是对照组就被所谓的污染很严重，我的操作都是一样的啊。你说的挑但菌落纯化我的实验是没有必要的，因为我只是想看看实验组和对照组变化有多大。以前没有培养过菌，所以有点摸不着北，外行看不懂什么才像我要的菌，什么是所谓的污染杂菌
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7楼2013-01-24 10:54:03
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神话米亚

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-24 11:12:21
听你说的这样应该是抗生素确实对昆虫有作用，但是从平板来看，以往像这样一片一片的有好几种菌基本都是染的杂菌，主要是经验，像操作过程（稀释梯度是否设计好），样品问题或者培养期间等都可能出现，一般方法就是 ...

谢谢，我会试试的，尽量优化
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9楼2013-01-24 11:20:42
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寒暄52

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得是被污染了哦
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10楼2013-01-24 11:43:32
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