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神话米亚

新虫 (初入文坛)

[求助] 帮忙看看这是不是被污染了啊?

我是做昆虫肠道菌的,具体做法是将虫子解剖取出肠道进行研磨,然后稀释倒平板。虫子是用三种方法喂养:1从幼虫开始喂食浸泡抗生素的叶片,2幼虫开始喂浸泡清水的叶片,3实验室一般的喂养,不做任何处理。这样涂完平板后基本出现的情况是:1完全不长菌(也没有杂菌)2长了一些菌(也没啥杂菌)3很多菌,也很杂,没法判断是不是被污染
我就是不能判断是本来应该就是这样还是被污染了,但是如果是污染的那为什么1和2的污染就几乎没有,而3的污染那么严重

15只室内虫 LB  6.JPG



15只室内虫 LB  7.JPG



15只室内虫 LB  9.JPG



15只室内虫 LB 10.JPG



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9-2.JPG



8.JPG
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神话米亚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhangxingc at 2013-01-24 08:54:31
确定污染,鉴定完毕!

第五个图应该就是没有污染的吧
5楼2013-01-24 10:34:50
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
神话米亚: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-24 11:20:13
引用回帖:
7楼: Originally posted by 神话米亚 at 2013-01-24 10:54:03
我是研究昆虫的,肠道菌只是我研究的一部分,我是想看看肠道菌群改变对昆虫的生长发育什么的会不会有影响,涂平板只是要看看喂抗生素后昆虫肠道菌群是否有被改变了。事实上变化是很明显的,就是抗生素组的平板非常 ...

听你说的这样应该是抗生素确实对昆虫有作用,但是从平板来看,以往像这样一片一片的有好几种菌基本都是染的杂菌,主要是经验,像操作过程(稀释梯度是否设计好),样品问题或者培养期间等都可能出现,一般方法就是要设计好阴性对照,比如稀释样品的液体涂布作为阴性对照,平行之间是否相同菌落生长,再就是实验重建性好不好这几个方面吧。楼主可以自己对照看看。
聪明才智要为意外做准备~~
8楼2013-01-24 11:12:21
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billtsu

木虫 (正式写手)

木木

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
神话米亚: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-01-24 19:33:22
1.染菌不太确定,注意要做多个梯度稀释
2.貌似板子长的时间有点久了(连成片的那几个),建议长得能挑菌落了就放四度保存,
3.不知道研磨肠道那步实验你是怎么操作的,反正那一步是应该加上一个空白对照的(排除操作污染)
4.个人感觉肠道微生物种群数量级不应该是这样的(但没仔细研究过),建议使用以下CDM培养基或者其他的培养基试试
5.培养条件,氧气含量,温度怎样设定的(肠道环境不太好说).
啊木
11楼2013-01-24 17:47:01
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普通回帖

丽羽寒梅

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
神话米亚: 金币+1, 有帮助 2013-01-24 11:20:56
从图片看可以确定是被污染了,因为从培养基中看到不同的菌落,呈油状的。
能认识你们是我的荣幸!
2楼2013-01-23 23:06:03
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
确定污染,鉴定完毕!
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
3楼2013-01-24 08:54:31
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神话米亚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 丽羽寒梅 at 2013-01-23 23:06:03
从图片看可以确定是被污染了,因为从培养基中看到不同的菌落,呈油状的。

细菌的菌落都要相同的吗?
4楼2013-01-24 10:34:09
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necilyx

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得可以把单菌落比较好的先再纯化一下,保藏,等再做一次的时候分离好后看看是不是同一种,对于第一张到第四张一片一片的很有可能是污染,可以比较一下看看这几个板子是不是染的同一种菌。
聪明才智要为意外做准备~~
6楼2013-01-24 10:41:49
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神话米亚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-24 10:41:49
我觉得可以把单菌落比较好的先再纯化一下,保藏,等再做一次的时候分离好后看看是不是同一种,对于第一张到第四张一片一片的很有可能是污染,可以比较一下看看这几个板子是不是染的同一种菌。

我是研究昆虫的,肠道菌只是我研究的一部分,我是想看看肠道菌群改变对昆虫的生长发育什么的会不会有影响,涂平板只是要看看喂抗生素后昆虫肠道菌群是否有被改变了。事实上变化是很明显的,就是抗生素组的平板非常干净,完全没被污染(没有贴上图),但是对照组就被所谓的污染很严重,我的操作都是一样的啊。你说的挑但菌落纯化我的实验是没有必要的,因为我只是想看看实验组和对照组变化有多大。以前没有培养过菌,所以有点摸不着北,外行看不懂什么才像我要的菌,什么是所谓的污染杂菌
7楼2013-01-24 10:54:03
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神话米亚

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by necilyx at 2013-01-24 11:12:21
听你说的这样应该是抗生素确实对昆虫有作用,但是从平板来看,以往像这样一片一片的有好几种菌基本都是染的杂菌,主要是经验,像操作过程(稀释梯度是否设计好),样品问题或者培养期间等都可能出现,一般方法就是 ...

谢谢,我会试试的,尽量优化
9楼2013-01-24 11:20:42
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寒暄52

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得是被污染了哦
10楼2013-01-24 11:43:32
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