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nfsmile

银虫 (小有名气)

[求助] 帮忙看下这是否是污染-脑微血管内皮细胞

做原代细胞以来,发现过这种现象好多次了,不知道是什么原因,不知道大家有没有遇到过。从培养基看来,清澈,也不像是污染,但是细胞就是状态不好了,每次都感觉突然间变成这样。细胞不再饱满了,瘦瘦的,上边还有很多黑点,周围有些小泡泡,感觉像是什么东西跟细胞竞争了营养。这种状态下,细胞可以再传代,也会贴,但长出来还是这个样子,求解~~
开始时这个样子



很严重的地方



正常的细胞
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静水流深0123

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

大鼠BMEC?你这个像是真菌污染。培养基不会变黄,开始时清澈,再养几天就变浑浊了。
2楼2012-05-11 11:07:56
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彭慧婷

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我也在做大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞0培养,但无法确定培养出的就是纯的脑微血管内皮细胞,做过几次八因子免疫组化,不知道是不是对的
3楼2012-07-16 11:48:27
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nfsmile

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 静水流深0123 at 2012-05-11 11:07:56
大鼠BMEC?你这个像是真菌污染。培养基不会变黄,开始时清澈,再养几天就变浑浊了。

应该是污染,不过我没有确定到底是什么污染···这个样子只好重新做
4楼2012-07-29 12:03:33
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歌媛宣

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

不像是真菌污染,真菌污染会漂浮有大量有菌丝的,而且肉眼可见培养基浑浊。你隔离培养看看,会不会长出菌丝。你说培养液没有浑浊的话考虑看下是不是支原体感染~
5楼2012-07-31 14:15:06
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nfsmile

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 歌媛宣 at 2012-07-31 14:15:06
不像是真菌污染,真菌污染会漂浮有大量有菌丝的,而且肉眼可见培养基浑浊。你隔离培养看看,会不会长出菌丝。你说培养液没有浑浊的话考虑看下是不是支原体感染~

请问一下,如果是支原体污染,细胞会变现出什么样的症状呢?
6楼2012-08-01 13:23:40
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歌媛宣

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by nfsmile at 2012-08-01 13:23:40
请问一下,如果是支原体污染,细胞会变现出什么样的症状呢?...

支原体污染细胞后,培养液可不发生浑浊,多数情况下细胞的病理变化轻微或者不显著,严重的会导致细胞增殖缓慢。支原体污染一般对细胞的影响是长期缓慢和潜在的。你可以用低渗溶胀处理地衣红染色法观察下,不过会麻烦些。你把培养瓶晃动下,看看有没有浑浊。
7楼2012-08-02 20:44:41
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s2011053

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我也遇到了相同的问题,我今天用TAPI染色了,但是我还是确定不了是不是支原体污染。我建议染色和PCR一起用确定是否支原体污染。
沧桑多巨变,唯我守初衷
8楼2012-11-12 16:15:04
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446046295

新虫 (初入文坛)

各位好,我也在做裸鼠的脑内皮细胞的原代培养,细胞传到第四代之后,接种后细胞贴壁但细胞还没有铺满,有的细胞又开始脱落了,这是怎么回事啊???急求大神解答!!!
9楼2012-11-19 09:41:25
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wangdove2011

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我感觉像是  黑胶虫吧?
你的培养基含不含血清?如果含有的话就要考虑下是不是血清的问题了  
我之前培养内皮细胞也出现过这样的情况,后来把配好的培养基用滤膜过滤下  情况就改善了 你可以试下
10楼2013-01-23 15:13:54
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