24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 599  |  回复: 7

jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白保存

在二十度的室温下,原核表达的蛋白能保存多长时间?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhenwuhuang

至尊木虫 (文学泰斗)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
量多,低温冷冻干燥!
2楼2013-01-23 17:41:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhenwuhuang at 2013-01-23 17:41:32
量多,低温冷冻干燥!

我是想在二十度下对蛋白进行酶切,时间短了怕切不开,长了又怕蛋白分解,不知道蛋白能坚持多长时间。
3楼2013-01-23 20:28:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
jiapingshk: 金币+10, 有帮助 2013-01-24 09:50:32
引用回帖:
3楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-01-23 20:28:17
我是想在二十度下对蛋白进行酶切,时间短了怕切不开,长了又怕蛋白分解,不知道蛋白能坚持多长时间。...

不知道你要做什么酶切,目的是什么,酶切后又想做什么分析。一般室温下蛋白质也不是那么容易分解的,只是温度高蛋白质会慢慢变性。事实上变性的蛋白往往是蛋白酶更好的底物。这种实验往往是在native条件下做的,虽然蛋白酶的活性降低了,但减少了蛋白自身变性影响酶切的因素。
4楼2013-01-24 08:06:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-24 08:06:37
不知道你要做什么酶切,目的是什么,酶切后又想做什么分析。一般室温下蛋白质也不是那么容易分解的,只是温度高蛋白质会慢慢变性。事实上变性的蛋白往往是蛋白酶更好的底物。这种实验往往是在native条件下做的,虽 ...

我是想用TEV蛋白酶切一个蛋白的组氨酸标签,切除标签后用核磁共振去分析蛋白结构,二十度切五个小时没问题吧?
5楼2013-01-24 09:54:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-01-24 09:54:21
我是想用TEV蛋白酶切一个蛋白的组氨酸标签,切除标签后用核磁共振去分析蛋白结构,二十度切五个小时没问题吧?...

我觉得你最好在4°C切过夜。20度当然活性更高一点,对蛋白来说4°C更稳定。
6楼2013-01-24 11:58:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiapingshk

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-01-24 11:58:22
我觉得你最好在4°C切过夜。20度当然活性更高一点,对蛋白来说4°C更稳定。...

可是我的这个蛋白不好切,4°C过夜切不动呀,只能提高温度了
7楼2013-01-24 14:18:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by jiapingshk at 2013-01-24 14:18:53
可是我的这个蛋白不好切,4°C过夜切不动呀,只能提高温度了...

有可能的话查一查蛋白的热稳定性资料。有些蛋白室温下的稳定性也不错的。祝你实验成功。
8楼2013-01-24 15:45:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiapingshk 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +11 ykyhsa 2026-04-05 12/600 2026-04-05 12:01 by jndximd
[考研] 315求调剂 +3 &123456789 2026-04-05 3/150 2026-04-05 11:57 by rainbow11
[考研] 0832食品科学与工程学硕282调剂 +6 鱼在水中游a 2026-04-02 9/450 2026-04-05 11:45 by flysky1234
[考研] 本科211 分数293请求调剂 +4 莲菜就是藕吧 2026-04-01 4/200 2026-04-04 22:32 by hemengdong
[考研] 材料调剂 +15 一样YWY 2026-04-01 15/750 2026-04-04 22:23 by hemengdong
[考研] 材料专硕 调剂 +13 CXN123456 2026-04-03 13/650 2026-04-04 21:59 by hemengdong
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 求调剂 +3 ffyyu 2026-04-02 3/150 2026-04-04 19:03 by 蓝云思雨
[考研] 兽医调剂 +3 wh119216 2026-04-02 3/150 2026-04-03 19:34 by zrongyan
[考研] 材料科学与工程339求调剂 +12 hyz0119 2026-03-31 13/650 2026-04-03 18:33 by ls刘帅
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +7 Yam. 2026-03-30 8/400 2026-04-03 14:12 by zhangdingwa
[考研] 化学070300-总分378-求调剂 +5 挪椅子的泡泡糖 2026-04-02 5/250 2026-04-02 22:20 by ZXlzxl0425
[考研] 296求调剂 +4 sdhu 2026-04-02 4/200 2026-04-02 21:29 by baoball
[考研] 22408 266求调剂 +3 masss11222 2026-04-02 3/150 2026-04-02 18:11 by 笔落锦州
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 一志愿346上海大学生物学 +3 上海大学346调剂 2026-04-01 3/150 2026-04-02 08:36 by w虫虫123
[考研] 一志愿北交材料工程总分358 +5 cs0106 2026-04-01 7/350 2026-04-01 11:45 by wangjy2002
[考研] 288资源与环境专硕求调剂,不限专业,有学上就行 +25 lllllos 2026-03-30 26/1300 2026-04-01 09:52 by 一只好果子?
[考研] 083000环境科学与工程调剂,总分281 +4 橙子(胜意) 2026-03-30 4/200 2026-03-31 00:44 by Linzejun
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
信息提示
请填处理意见