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888yue888

金虫 (正式写手)

[求助] 我该怎么办?求乳酸菌通用引物,求大侠指点实验!!!

从中国菌库买的嗜酸乳杆菌,制成可作用于肠道的药,小鼠灌胃,饲喂5天(纠结),检测十二指肠内容物,想做DGGE和realtime pcr,看我的菌是否固定在肠道, 需要构建乳酸菌质粒,做realtime标准曲线,我就定乳酸菌就可以了,开始用341,907pcr  效果不错,DGGE条带也很好,不过老板嫌乱,而且也不能realtime,要个只有乳酸菌的图图
试了2个引物都pcr不出来 我可咋办啊
初步感觉dgge做341 907就够了
还有就是实验设计总觉得不正确,谁帮我想想,饲喂几天 怎么说明问题 详细点
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jernny

铜虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不懂,还是来转一转咯。
2楼2013-01-23 11:41:22
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888yue888

金虫 (正式写手)

谢谢 算是帮我顶帖了
3楼2013-01-23 15:22:11
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉你这个应该是多庞大的实验。dgge可以初步判定一个量,5天是怎么来的?确定定值可以取肠段做fish啊。做realtime那还得停止灌胃确定不是未定值但又未来的及排出体外的菌哦

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
修炼ing,当虫仙……
4楼2013-01-25 13:35:04
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你这个肠道本来就有乳酸杆菌的,是不是需要标记一下再做呢?
5楼2013-01-25 14:16:43
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