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汕头大学海洋科学接受调剂
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Jireh

铜虫 (小有名气)

[求助] 换了仪器和柱子后,HPLC标品出峰过早,求助。不甚感激~~~

之前用岛津的HPLC紫外检测,250mm 普通的C18柱,用的是水:乙腈=90:10,检测的样品在11min出峰。一切很正常。
换了地方做实验,Jasco的HPLC DAD检测器(似乎更好了),用150mm或者100mm的C18柱,用相同的方法,或者水:乙腈=95:5,检测出来的峰和进样峰完全重叠,在1.8min处就出峰了。只不过相比起对照,峰更高,而且该标品的光谱图和文献的相比,很相似。大概能确定样品没有问题。
该仪器也运转正常,其他人的样品能跑的很好。

所以,现在的问题是,如何让样品出峰晚点阿?
试过 好多次了,捉急死人了。。。求助各位大虾阿~~~
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微笑rose

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

改变流动相的比例,加大水相试试
像向日葵一样永远向着阳光,充满能量
12楼2013-05-27 17:17:57
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13631569690

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
250mm的长柱 换成150mm或100mm短柱,本来出峰就会提前的,90:10流动相换成95:5同样会提前出峰,想出峰就换回长柱或提高水的比例就OK了
2楼2013-01-23 08:46:03
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13631569690

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-01-23 10:36:32
Jireh: 金币+2, 有帮助 2013-01-23 18:24:41
250mm的长柱 换成150mm或100mm短柱,本来出峰就会提前的,90:10流动相换成95:5同样会提前出峰,想出峰晚点就换回长柱或提高水的比例就OK了
3楼2013-01-23 08:47:07
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hujychem

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
crity328: 金币+1, 感谢交流,欢迎常来~ 2013-01-23 10:36:43
Jireh: 金币+2, 有帮助 2013-01-23 18:27:14
1、检测出来的峰和进样峰完全重叠,在1.8min处就出峰了。==>这个是指在仪器上无论是更换柱子还是改变流动相比例,出峰时间都是1.8min?
2、如果要晚出峰,为何要更换更短的柱子呢?先用同规格柱子在这个仪器上试一下吧。
3、还有个疑问,如果保留时间由11min减少到1.8min,在流速相同的情况下,即使柱子变短也不会提前这么长时间出峰,有点儿像柱子对样品无保留时的出峰情况。
4楼2013-01-23 08:49:44
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