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sunyonglizi

金虫 (小有名气)

[求助] 可以加入试剂停止酶促反应吗

酶促反应体系:缓冲液中加入适量爱普特列溶液,SRD5A,NADPH,37℃反应,加入甲醇停止反应。
文献中提到加甲醇可以停止此反应,甲醇可以立即停止反应吗,为什么?
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

不是很清楚,你直接用就好了,如果有兴趣了哈,可以做个机制研究
2楼2013-01-27 23:22:16
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齐美凤87

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好,我课题貌似和你很接近,我还没做到你的那一步,我现在用PH7.0或者7.4Tris-Hcl配制的NADPH很不稳定,NADPH的终溶度是0.5mM,为什么我在没有加5a-还原酶的情况下,NADPH的OD值就在下降,而且10min内会下降0.2左右,这是为什么,希望你可以帮我解答。
3楼2013-07-29 20:38:23
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pal2004

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

加甲醇,酶就变性了吧。
NADPH易氧化,使用时最好放冰盒上,平时-20℃保存。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2013-07-30 09:45:09
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uenzyme

银虫 (小有名气)

楼主,请问你的问题解决了吗?我也遇到相同的问题,我也做5a-reductase抑制实验。340nm测NADPH,但OD值降落的太少了。又看文献说是反应之后用ELISA,我在试
5楼2017-03-23 18:04:14
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