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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药理学 » 可以加入试剂停止酶促反应吗
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sunyonglizi

金虫 (小有名气)

[求助] 可以加入试剂停止酶促反应吗

酶促反应体系：缓冲液中加入适量爱普特列溶液，SRD5A,NADPH，37℃反应，加入甲醇停止反应。
文献中提到加甲醇可以停止此反应，甲醇可以立即停止反应吗，为什么？
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1楼 2013-01-22 21:41:18
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

不是很清楚，你直接用就好了，如果有兴趣了哈，可以做个机制研究
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2楼2013-01-27 23:22:16
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齐美凤87

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

您好，我课题貌似和你很接近，我还没做到你的那一步，我现在用PH7.0或者7.4Tris-Hcl配制的NADPH很不稳定，NADPH的终溶度是0.5mM，为什么我在没有加5a-还原酶的情况下，NADPH的OD值就在下降，而且10min内会下降0.2左右，这是为什么，希望你可以帮我解答。
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3楼2013-07-29 20:38:23
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pal2004

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

加甲醇，酶就变性了吧。
NADPH易氧化，使用时最好放冰盒上，平时-20℃保存。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2013-07-30 09:45:09
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uenzyme

银虫 (小有名气)
楼主，请问你的问题解决了吗？我也遇到相同的问题，我也做5a-reductase抑制实验。340nm测NADPH，但OD值降落的太少了。又看文献说是反应之后用ELISA，我在试
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5楼2017-03-23 18:04:14
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