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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

[求助] 硅胶色谱纯化

大家好,求助有经验的虫虫帮忙解决中高压制备色谱问题。
我要制备纯化黄酮,用正相硅胶色谱柱,洗脱剂是甲醇乙酸乙酯,分离效果很不好,吸光度一直都很低,但是做薄层层析时,样品还是能分开的,就是拖尾现象严重,加醋酸后就好多了。可为什么上柱子就分离效果不好了呢?求解啊,谢谢!
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

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★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xbqewpq: 2013-01-22 12:23:10
ZB镜花水月: 金币+2, 有帮助 2013-01-23 09:01:25
跑板用的硅胶目数更大,硅胶层析用的一般较粗,理论塔板数更大,所以板跑的好,柱层析不一定好的原因。估计楼主还需要摸摸洗脱剂体系。
嘻哈哈
2楼2013-01-20 18:41:45
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-01-20 18:41:45
跑板用的硅胶目数更大,硅胶层析用的一般较粗,理论塔板数更大,所以板跑的好,柱层析不一定好的原因。估计楼主还需要摸摸洗脱剂体系。

谢谢,我疑惑的是,是否是甲醇乙酸乙酯洗脱剂不行?大家都说不太好,但又说不清是什么原因
3楼2013-01-20 20:55:23
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chenyuanli

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
ZB镜花水月: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-01-23 09:00:01
环己烷:乙酸乙酯(8:2)    <     氯仿:丙酮(95:5)     <      苯:丙酮(9:1)    <苯:乙酸乙酯(8:2)         <     氯仿:乙醚(9:1)      <      苯:甲醇(95:5)   < 苯:乙醚(6:4)             <    环己烷:乙酸乙酯(1:1) <       氯仿:乙醚(8:2) < 氯仿:甲醇(99:1)         <     苯:甲醇(9:1)         <      氯仿:丙酮(85:15)< 苯:乙醚(4:6)            <    苯: 乙酸乙酯(1:1)     <      氯仿:甲醇(95:5) < 氯仿:丙酮(7:3)          <     苯: 乙酸乙酯(3:7)    <      苯:乙醚(1:9)    < 乙醚:甲醇(99:1)         <     乙酸乙酯:甲醇(99:1)  <      苯:丙酮(1:1)    < 氯仿:甲醇(9:1)。看看以上体系有没有合适的,两相极性差异大些好点
嘻哈哈
4楼2013-01-20 23:03:45
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ZB镜花水月

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyuanli at 2013-01-20 23:03:45
环己烷:乙酸乙酯(8:2)    <     氯仿:丙酮(95:5)     <      苯:丙酮(9:1)    <苯:乙酸乙酯(8:2)         <     氯仿:乙醚(9:1)      <      苯:甲醇(95:5)   < 苯:乙醚(6:4)      ...

嗯,谢谢
5楼2013-01-21 09:28:49
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121cxh-5

新虫 (初入文坛)

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★ ★
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ZB镜花水月: 金币+2, 有帮助 2013-01-23 08:59:28
有拖尾就很难分开,只能碰运气,建议使用反相液相。
6楼2013-01-21 19:56:07
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hujychem

银虫 (小有名气)

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★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ZB镜花水月: 金币+2, 有帮助 2013-01-23 08:59:40
正相制备的话容易受到湿度干扰,造成分离度和保留时间的不确定,也是建议用反相色谱试一下。
7楼2013-01-22 09:46:47
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