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fanwq258

木虫 (正式写手)

[求助] western-blot显完色整个泳道都亮是怎么回事

我做的是蛋白质羰基化，杂完抗体显色照相就变这样了，而且边缘效应一直没办法避免……跪求大师指点

dell 2013-01-16 12 小时 16 分钟_Exposure_117.5sec.jpg
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
1楼2013-01-16 16:38:48
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by zhang881007 at 2013-01-17 19:43:33
是不是胶做完放了很长时间？！操作不严格，清洗上出问题了

我一直都是跑完胶直接转膜的洗一抗是4次每次15分钟，二抗一样。
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
10楼2013-01-20 11:14:46
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ccharlien

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
fanwq258: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-01-17 10:07:04
可能是蛋白量太大或者抗体浓度太高或者没洗干净
也有可能是曝光的问题，用敏感度低的底物试试
而且这个117.5sec是曝光时间么？太长了，如果这么强的话曝光5秒看看
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3楼2013-01-17 06:47:19
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fanwq258

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by ccharlien at 2013-01-17 06:47:19
可能是蛋白量太大或者抗体浓度太高或者没洗干净
也有可能是曝光的问题，用敏感度低的底物试试
而且这个117.5sec是曝光时间么？太长了，如果这么强的话曝光5秒看看

我这是在化学发光成像系统上照的，第一张是5秒的时候出来的，没这么亮，但是荧光也弥散了整条泳道……可能是浓度太大，我跑个浓度梯度试试
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要么好好活，要么死，拒绝半死不活
5楼2013-01-17 10:06:46
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飞飞050227

金虫 (小有名气)
小范同学，我也注册啦哈哈
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生命不息，实验不止！
6楼2013-01-17 10:43:15
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